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配方：纖溶酶在6%交聯(lián)瓊脂糖珠上，以50%的純甘油漿提供。

配體密度：0.2mg/ml樹脂。

應用：**、方便地切割含有纖溶酶特異性切割位點的重組融合蛋白。

方案：為了找到一個目標蛋白的**切割條件，建議在小范圍內進行初步的切割反應。與纖溶酶的成功切割依賴于靶蛋白的正確折疊，使酶能夠進入纖溶酶識別序列。一旦達到目標酶切的**條件，就可以得到整個蛋白質裂解的**條件。在建立裂解反應之前，目標蛋白應純化至均勻，并在50 mM Tris緩沖液、0.1 M NaCl、pH 7.4下透析。

1） 輕輕地旋轉著珠子。不要渦流。

2） 將50µl懸浮液等分，并添加到1 mg Eppendorf管中的目標蛋白質中。目標蛋白的推薦濃度為1mg/ml。

3） 通過倒置試管（不要渦流）輕輕混合，并在37°C的旋轉搖床上搖動

4） 以固定的時間間隔旋轉試管，將試樣等分并立即冷凍。反應結束后，用SDS-PAGE分析樣品。

5） 為了避免過度卵裂，不要長時間孵化。

裂解目標蛋白的回收：

1） 融合蛋白完全裂解后，將反應混合物在1500 x g下旋轉2-3分鐘。

2） 去除上清液，并用0.2 ml 50 mM Tris緩沖液（pH 7.4）清洗珠子。

3） 重復步驟1和2以**限度地回收目標蛋白及其裂解片段。進一步的層析可能需要從目標蛋白中去除裂解片段。

儲存條件-20°C

裝運條件凝膠包

僅供研究使用！不用于人類。