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亮點配方：6%交聯(lián)瓊脂糖珠提供50%的純甘油漿液。

配體密度：1mg/ml樹脂。

應用：**、方便地切割含有凝血酶特異性裂解位點的重組融合蛋白。

方案：為了找到一個目標融合蛋白的**切割條件，建議在小范圍內進行初步的切割反應。凝血酶的成功裂解依賴于融合蛋白的正確折疊，使酶能夠進入凝血酶識別序列。一旦獲得了**的切割條件，反應就可以放大，以裂解全部的目標融合蛋白。靶融合蛋白應純化至均勻，并在50 mM Tris緩沖液、0.1 M NaCl、pH 8.0下透析，然后開始裂解反應。

1） 輕輕地旋轉著珠子。不要渦流。

2） 等分15µl懸浮液，并將其添加到1 mg Eppendorf管中的融合蛋白中。靶融合蛋白的推薦濃度為1mg/ml。

3） 倒置試管輕輕混合（不要漩渦），并在室溫下在旋轉搖床上輕輕搖動。

4） 以固定的時間間隔旋轉試管，將試樣等分并立即冷凍。反應結束后，用SDS-PAGE分析樣品。

裂解目標蛋白的回收：

1） 在融合蛋白完全裂解后，以5000轉/分的速度旋轉反應混合物2-3分鐘。

2） 去除上清液，用0.2 ml 50 mM Tris緩沖液（pH 8）清洗珠子。

3） 重復步驟1和2以**限度地回收目標蛋白及其裂解片段。進一步的層析可能需要從目標蛋白中去除裂解片段。

儲存條件-20°C

裝運條件凝膠包

僅供研究使用！不用于人類。