熒光標(biāo)記多肽(不同序列號的多肽)
西安pg電子官方生物提供CY系列菁染料CY3、CY5、CY5.5、CY7、CY7.5,ICG,熒光素FITC,Bodipy系列染料,香豆素及雙光子香豆素系列染料,近紅外區(qū)域IR系列,ICG系列染料,TO噻唑橙系列染料,
一、什么是熒光標(biāo)記?
熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光物質(zhì)。熒光物質(zhì)是指具有共軛雙鍵體系化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物,受到紫外光或藍(lán)紫光照射時,可激發(fā)成為激發(fā)態(tài),當(dāng)從激發(fā)態(tài)恢復(fù)基態(tài)時,發(fā)出熒光。
二、熒光標(biāo)記的位點(diǎn)
熒光標(biāo)記物質(zhì)可以直接和多肽的N端直接相連(如異硫氰酸熒光素的連接, 通常在多肽的N端和異硫氰酸熒光素直接插一個氨基乙酸或者β-丙氨酸。),或者在C端和賴氨酸(或半胱氨酸)的側(cè)鏈連接、或者在其它可以連接的位子連接。
三、熒光標(biāo)記的舉例
1. FITC修飾多肽:
異硫氰酸熒光素(FITC)具有比較高的活性,通常來說,在固相合成過程中引入該種熒光基團(tuán)相對于其他熒光素要更容易,并且反應(yīng)過程中不需要加入活化試劑。
FITC修飾的多肽通常主要有兩種形式:
(1)在整條肽鏈N端接入FITC,并且在FITC之前接入一分子的Acp(6-氨基己酸),也稱烷基間隔器。反應(yīng)中FITC與肽鏈上裸露的-NH2反應(yīng),Acp的接入提供了六個碳的直鏈空間,大大降低了反應(yīng)的空間位阻,提高了反應(yīng)效率,降低了反應(yīng)難度。其次,F(xiàn)ITC還與多肽結(jié)構(gòu)中的-SH,側(cè)鏈-NH2反應(yīng),Acp的加入也降低了這種副反應(yīng)發(fā)生的可能。此外,多肽在酸性環(huán)境條件下切割時,在N端接入FITC的多肽需要經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素,這種過程通常都會伴隨一個氨基酸的切除,而烷基間隔器Acp的接入就避免了這一情況的發(fā)生。
(2)在整條肽中的某個Lys側(cè)鏈接入FITC,Lys側(cè)鏈為末端為-NH2的四碳直鏈烷基,直接起到了降低空間位阻的作用。這種修飾方式能夠靈活的在整條肽中任何位置進(jìn)行FITC修飾,而不僅僅局限于末端。
2. 香豆素AMC修飾
7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)是一種熒光標(biāo)記試劑,例如,酶的痕量測定,酶的鑒定,激光染料的制備等多種用途,此外,C端用香豆素修飾的泛素分子也是研究蛋白質(zhì)泛素化過程的重要探針。
與其他熒光染料不同的是,AMC修飾多肽分子是從C端進(jìn)行:(1)AMC與肽鏈C端的一個氨基酸反應(yīng);(2)固相合成整條肽鏈(從**個氨基酸開始),并且保留整條肽鏈的側(cè)鏈保護(hù)基和一個氨基保護(hù)基;(3)液相縮合AA-AMC與全保護(hù)的肽鏈;(4)切除保護(hù)基,完成肽鏈的修飾。
3. 5-FAM修飾
通常用于激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞技術(shù)的運(yùn)用。
4. Rhodamine B(羅丹明 B)修飾
羅丹明B是眾多羅丹明染料中的一種,用于熒光測定。
5. 5-TAMRA 修飾
5-TAMRA是用于標(biāo)記肽和蛋白質(zhì)的流行的橙色熒光團(tuán)之一。
6. Cy 3和 Cy 5修飾
Cy3 and Cy5 是高消光系數(shù)的染料。因此,它們特別適用于細(xì)胞內(nèi)的多肽定位實驗。它們的缺點(diǎn)是在多肽合成的環(huán)境中非常的不穩(wěn)定,因此合成的量相對低。
西安pg電子官方生物提供用熒光標(biāo)記
細(xì)胞穿膜肽(cell-penetrating peptides,CPPs)
血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)
SP94多肽
奧曲肽(OTC)
細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)肽R8
RVG29多肽
線性肽
**肽
美容肽
底物肽
血管緊張肽Angiotensin系列
β-Amyloid 淀粉肽系列
GLP系列多肽
偽二肽
穿膜肽
**多肽中間體
化妝品多肽
磷酸化多肽
抗菌肽
生物抗菌肽
多肽合成用樹脂
抗菌性活性肽
細(xì)胞因子模擬肽
免疫活性肽
神經(jīng)活性肽
其他活性肽