為了闡明udp -葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)在灰樹(shù)花(Grifola frondosa)菌絲生長(zhǎng)和多糖合成中的潛在作用,我們克隆了一個(gè)編碼53.17 kda蛋白的udp -葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)基因gfugp,該基因全長(zhǎng)2036-bp。
構(gòu)建了兩個(gè)雙啟動(dòng)子RNA沉默載體pAN7-iUGP-P-dual和pAN7-iUGP-C-dual,分別針對(duì)gfugp的啟動(dòng)子或保守的功能序列下調(diào)gfugp的表達(dá)。
結(jié)果表明,沉默的gfugp啟動(dòng)子序列與保守序列相比,具有更高的下調(diào)效率,降低了菌絲生長(zhǎng)和多糖生成的速度。
菌絲的單糖成分/百分比和exo-polysaccharides**改變了半乳糖和阿拉伯糖含量的增加可能是因?yàn)閴KUDP-glucose供應(yīng)gfugp沉默和糖代謝的改變通過(guò)上調(diào)UDP-glucose-4-epimerase (gfuge)和UDP-xylose-4-epimerase (gfuxe)轉(zhuǎn)錄。
本研究結(jié)果可為了解蘑菇多糖的生物合成途徑,并通過(guò)代謝調(diào)控提高多糖的產(chǎn)量提供參考。
UDP-L-RhaNAc | UDP-4n-D-FucNAc |
UDP-D-XylNAc | UDP-VioNAc |
UDP-2-Biotinyl-GalNAc | UDP-6-Biotinyl-GalNAc |
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