CY3-Thioredoxin,CY3標(biāo)記硫氧還蛋白的結(jié)構(gòu)合成
產(chǎn)品名稱:CY3-Thioredoxin,CY3標(biāo)記硫氧還蛋白
純度:95%+
CY3標(biāo)記的硫氧還蛋白(Cy3-Thioredoxin)是通過將熒光染料CY3與硫氧還蛋白分子特定位點(diǎn)進(jìn)行共價(jià)偶聯(lián)而制得的標(biāo)記蛋白。硫氧還蛋白是一種小型、具有催化活性的氧化還原蛋白,含有活性位點(diǎn)二硫鍵,用于調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)。
結(jié)構(gòu)合成過程首先涉及硫氧還蛋白的表達(dá)和純化,確保蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)完整且活性位點(diǎn)暴露。隨后選擇合適的化學(xué)修飾策略以實(shí)現(xiàn)CY3的定點(diǎn)偶聯(lián)。常用的方法是利用CY3-NHS酯與蛋白表面賴氨酸殘基的伯胺基反應(yīng),或使用含巰基的CY3衍生物與蛋白中游離半胱氨酸形成穩(wěn)定的硫醚鍵。
標(biāo)記前,蛋白質(zhì)通常在緩沖液中穩(wěn)定存在,pH控制在7.5-8.5以維持蛋白構(gòu)象和反應(yīng)活性。通過優(yōu)化反應(yīng)物比例和時(shí)間,保證偶聯(lián)效率同時(shí)避免過度標(biāo)記導(dǎo)致蛋白功能喪失。
標(biāo)記反應(yīng)完成后,采用透析或凝膠過濾進(jìn)行純化,去除游離染料及副產(chǎn)物。純化后對標(biāo)記蛋白進(jìn)行光譜分析,包括紫外-可見吸收和熒光發(fā)射特性,確認(rèn)CY3的成功偶聯(lián)及其熒光性質(zhì)。
結(jié)構(gòu)分析采用圓二色譜(CD)和核磁共振(NMR)等技術(shù)驗(yàn)證蛋白二級結(jié)構(gòu)的維持,確保標(biāo)記過程未破壞蛋白的三維構(gòu)象。質(zhì)譜分析用于鑒定偶聯(lián)位點(diǎn)及偶聯(lián)數(shù)目,保證標(biāo)記的均一性和可控性。
整體合成體現(xiàn)了CY3與硫氧還蛋白的高效偶聯(lián)能力和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性,為研究其生物化學(xué)功能及動態(tài)變化提供了有效工具。該標(biāo)記蛋白可應(yīng)用于熒光成像和蛋白質(zhì)相互作用研究。
性狀:固體或液體
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:pg電子官方生物
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