產(chǎn)品名稱:DSPE-PEG-cRGD-CY5的主要合成步驟
合成方法
1. 主要合成步驟
DSPE活化:
將DSPE的末端羥基(-OH)轉(zhuǎn)化為氨基(-NH?),常用試劑為硫代乙酸(CH?COSH)或硫脲(NH?CSNH?)。
PEG連接:
通過(guò)酰胺鍵或硫醚鍵將活化DSPE與PEG鏈連接,形成DSPE-PEG。
純化:
采用柱層析或透析法去除副產(chǎn)物,得到高純度DSPE-PEG。
cRGD活化:
將cRGD肽的羧酸基團(tuán)轉(zhuǎn)化為NHS酯,提高反應(yīng)活性。
偶聯(lián)反應(yīng):
在EDC/NHS催化下,DSPE-PEG與活化cRGD反應(yīng),形成酰胺鍵。
純化:
通過(guò)色譜法或結(jié)晶法去除未反應(yīng)試劑,確保產(chǎn)物純度≥95%。
CY5-NHS酯制備:
將CY5的羧酸基團(tuán)轉(zhuǎn)化為NHS酯。
末端連接:
在EDC/NHS催化下,CY5-NHS酯與DSPE-PEG-cRGD的氨基或羥基反應(yīng),形成共價(jià)鍵。
最終純化:
通過(guò)色譜法(如C18柱)或透析法去除未反應(yīng)試劑,得到DSPE-PEG-cRGD-CY5。
2. 表征手段
NMR:驗(yàn)證DSPE的脂鏈、PEG鏈、cRGD肽及CY5的特征峰。
MS:確認(rèn)分子量及連接方式。
熒光光譜:測(cè)定激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)及熒光量子產(chǎn)率(通!20%)。
動(dòng)態(tài)光散射(DLS):若形成膠束或脂質(zhì)體,測(cè)定粒徑及分布(通常50-200 nm)。
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