Fmoc-FFRIKFERQ-OH 溶酶體靶向肽及其熒光標(biāo)記物介紹
Fmoc-FFRIKFERQ-OH 是一條功能性非標(biāo)記多肽,其中:
Fmoc 為保護(hù)基,用于在合成過(guò)程中保護(hù)N端;
氨基酸序列為 Phe-Phe-Arg-Ile-Lys-Phe-Glu-Arg-Gln;
OH 表示為游離羧基結(jié)構(gòu)。
一、溶酶體靶向序列特征:
該序列富含疏水性(Phe、Ile)、帶正電(Arg、Lys)與帶負(fù)電(Glu)殘基,這種結(jié)構(gòu)特征能夠介導(dǎo)與細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)特別是溶酶體膜蛋白的非特異性結(jié)合,并可能誘導(dǎo)該多肽局部聚集或穿膜作用,有助于其進(jìn)入溶酶體。
二、熒光標(biāo)記策略:
由于Fmoc保護(hù)基存在于N端,因此若用于成像,需在去除Fmoc后再進(jìn)行標(biāo)記。常用標(biāo)記物包括:
FITC(綠色):適合體外細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn);
CY5/CY7(紅外):適合動(dòng)物模型體內(nèi)示蹤;
Rhodamine B/CY3:適合共聚焦激光成像。
標(biāo)記部位建議選擇賴(lài)氨酸(K)側(cè)鏈或N端,以減少對(duì)生物活性的干擾。
三、用途與優(yōu)勢(shì):
可作為納米材料修飾肽,賦予其溶酶體定位能力;
熒光標(biāo)記后用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)吞路徑與藥物釋放;
能與蛋白或聚合物連接構(gòu)建響應(yīng)系統(tǒng)。
四、合成與標(biāo)記注意事項(xiàng):
Fmoc合成后需脫保護(hù),純化后再標(biāo)記;
標(biāo)記完成后需使用HPLC和MS確認(rèn)結(jié)構(gòu);
多肽中的疏水區(qū)域可能影響水溶性,需優(yōu)化緩沖條件。
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