FITC-TSA，即熒光素標(biāo)記酪胺（Fluorescein Tyramide），是一種高靈敏度信號放大染料，用于TSA（Tyramide Signal Amplification）系統(tǒng)。其化學(xué)名稱為N-(3-Hydroxyphenethyl)fluorescein-5-carboxamide，分子中同時(shí)包含了具有熒光發(fā)射功能的FITC（熒光素異硫氰酸酯）部分和一個(gè)酪胺（tyramine）結(jié)構(gòu)單元。通過與過氧化物酶（如HRP）協(xié)同使用，F(xiàn)ITC-TSA可用于信號增強(qiáng)成像、免疫組織化學(xué)、原位雜交和免疫印跡等生物檢測方法中。

英文名 Fluorescein tyramide

CAS號 210236-90-1

分子量 495.49

分子式 C29H21NO7

熔點(diǎn) N/A

結(jié)構(gòu)與功能設(shè)計(jì)

FITC-TSA結(jié)構(gòu)主要由兩個(gè)功能域構(gòu)成：

FITC熒光素部分
負(fù)責(zé)熒光發(fā)射，是廣泛使用的綠色熒光染料。它具有高量子產(chǎn)率、良好的光穩(wěn)定性和標(biāo)準(zhǔn)激發(fā)/發(fā)射波長，適用于絕大多數(shù)熒光顯微鏡系統(tǒng)。

Tyramide結(jié)構(gòu)（酪胺）
酪胺是信號放大反應(yīng)中的核心反應(yīng)基團(tuán)。在存在HRP（辣根過氧化物酶）和過氧化氫（H?O?）的條件下，酪胺基團(tuán)被催化活化為高反應(yīng)性的自由基，并迅速與周圍的酪氨酸殘基發(fā)生共價(jià)鍵合，將FITC永久性沉積在靶點(diǎn)周圍。

應(yīng)用領(lǐng)域

1. 免疫組化（IHC）

FITC-TSA廣泛用于檢測組織切片中微量抗原的表達(dá)。由于其高信號放大能力，能在傳統(tǒng)一抗二抗體系之外顯著增強(qiáng)熒光信號，使得弱表達(dá)或稀有標(biāo)志物得以清晰可視化。

2. 原位雜交（ISH）

在檢測mRNA或基因擴(kuò)增信號時(shí)，F(xiàn)ITC-TSA常與HRP標(biāo)記的探針體系配合使用，使得微弱信號在細(xì)胞內(nèi)被清晰放大。

3. 多重?zé)晒鈽?biāo)記

通過不同熒光TSA衍生物（如FITC、Cy3、Cy5等）配合使用，可以在同一組織切片中同時(shí)檢測多個(gè)靶點(diǎn)，提高空間解析能力。

4. 流式細(xì)胞術(shù)增強(qiáng)染色

在多參數(shù)流式分析中，F(xiàn)ITC-TSA可用于對表達(dá)水平較低的細(xì)胞表面或胞內(nèi)抗原的放大染色，提高檢測分辨率。

5. 免疫印跡（Western Blot）

當(dāng)?shù)鞍妆磉_(dá)量較低，無法用常規(guī)抗體染色法檢測時(shí)，使用TSA增強(qiáng)策略能實(shí)現(xiàn)高靈敏度的條帶顯影。

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