FITC-Hemoglobin(綠色熒光素標(biāo)記血紅蛋白)定制合成技術(shù)
技術(shù)概述
FITC(熒光素異硫氰酸酯)是一種廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)標(biāo)記的綠色熒光染料,可與蛋白質(zhì)中的**胺基(主要為賴氨酸殘基)特異性共價結(jié)合。將FITC與血紅蛋白(Hb)**偶聯(lián),不僅能實(shí)現(xiàn)Hb在體內(nèi)的可視化追蹤,也可用于氧輸運(yùn)研究、光熱治療載體標(biāo)記、蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)示蹤等方向。
合成工藝流程
1. 材料準(zhǔn)備
血紅蛋白(人源/牛源)
FITC(溶于DMSO或碳酸鹽緩沖液)
緩沖液:0.1 M 碳酸氫鈉緩沖液,pH 9.0
2. FITC標(biāo)記反應(yīng)
將Hb溶解于碳酸鹽緩沖液中(1–10 mg/mL)。
加入FITC溶液(摩爾比FITC:Hb ≈ 10:1),避光反應(yīng)4–12 h,溫度控制在4°C。
反應(yīng)過程中適時攪拌,防止蛋白沉淀。
3. 分離純化
使用Sephadex G-25凝膠過濾柱或超濾(10 kDa膜)去除未結(jié)合的FITC。
可通過透析進(jìn)一步去除小分子。
4. 標(biāo)記效率評估
使用紫外-可見光分光光度計(jì)檢測280 nm(蛋白)和495 nm(FITC)吸收。
計(jì)算標(biāo)記度:FITC/Hb摩爾比
可使用熒光光譜(λ_ex=495 nm, λ_em=519 nm)確認(rèn)熒光性能。
5. 儲存條件
避光、4°C保存于PBS或HEPES中,避免反復(fù)凍融。
技術(shù)亮點(diǎn)
FITC標(biāo)記保留Hb結(jié)構(gòu)和功能,適用于活體成像、細(xì)胞攝取研究。
工藝溫和,適合大規(guī)模生物標(biāo)記制備。
可拓展為氧釋放可視化研究平臺。
產(chǎn)地:西安pg電子官方生物
用途:科研
西安pg電子官方生物是一家在生物科技領(lǐng)域深耕細(xì)作、成果斐然的企業(yè)。公司擁有富有創(chuàng)新精神的科研團(tuán)隊(duì),他們憑借深厚的專業(yè)知識和豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),不斷探索生物科技的前沿領(lǐng)域。在產(chǎn)品方面,西安pg電子官方生物涵蓋了生物試劑、化學(xué)試劑、納米材料等眾多品類。這些產(chǎn)品性能穩(wěn)定,廣泛應(yīng)用于科研院校的課題研究、醫(yī)藥企業(yè)的藥物研發(fā)以及工業(yè)生產(chǎn)的檢測分析等多個場景,為推動相關(guān)領(lǐng)域的發(fā)展提供了有力支持。
相關(guān)推薦:
塞來昔布前藥固體分散體 CXB-m PEG-SD
乙烯基醚修飾的喜樹堿前藥;VE-CPT
紫杉醇肉豆蔻酸酯脂質(zhì)體 PTX-MA-L
紫杉醇棕櫚酸酯脂質(zhì)體 PTX-PA-L
紫杉醇硬脂酸酯脂質(zhì)體 PTX-SA-L
谷胱甘肽刺激響應(yīng)型前藥納米凝膠(HHNP)