蛋白偶聯(lián)肽定制技術(shù)(Protein–Peptide Conjugation)
1. 技術(shù)背景
蛋白偶聯(lián)肽是通過化學(xué)或酶促手段將功能性多肽與天然蛋白(如BSA、HSA、OVA、KLH、抗體、酶等)進(jìn)行共價(jià)偶聯(lián),以賦予肽分子免疫原性、靶向性或增強(qiáng)其生物學(xué)功能。該類偶聯(lián)物廣泛用于疫苗開發(fā)、抗體制備、診斷試劑、生物傳感與藥物遞送系統(tǒng)等領(lǐng)域。
2. 可偶聯(lián)蛋白種類
蛋白類型 | 常用示例 | 應(yīng)用方向 |
載體蛋白 | BSA、OVA、KLH、HSA | 抗原設(shè)計(jì)、疫苗佐劑 |
酶類蛋白 | HRP、AP、GFP | 成像標(biāo)記、活性追蹤 |
抗體類蛋白 | IgG、Fab | 靶向遞送、免疫組化 |
信號(hào)蛋白 | TGF-β、EGF | 生物活性增強(qiáng) |
受體蛋白 | Integrin、CD分子 | 細(xì)胞靶向、細(xì)胞攝取 |
3. 常用偶聯(lián)方式
偶聯(lián)策略 | 基團(tuán)要求 | 連接化學(xué) | 特點(diǎn) |
EDC/NHS | -COOH 與 -NH? | 酰胺鍵 | 經(jīng)典、穩(wěn)定 |
戊二醛交聯(lián) | -NH? 與 -NH? | 醛胺縮合 | 溫和、廣譜 |
Maleimide–thiol | -SH 與 -Mal | Michael 加成 | 高選擇性 |
Click 化學(xué) | -N? 與 -C≡CH | Huisgen 環(huán)化 | 正交、高效 |
碘代酰胺法 | 半胱氨酸位點(diǎn)標(biāo)記 | 特異修飾 | 精準(zhǔn)定位 |
4. 多肽設(shè)計(jì)要求
接頭設(shè)計(jì):常加入Gly-Gly、PEG?等作為柔性橋梁
功能位點(diǎn)暴露:避免關(guān)鍵位點(diǎn)被偶聯(lián)影響
端基修飾:如在N/C端引入Cys、Lys等偶聯(lián)位點(diǎn)
5. 偶聯(lián)流程
多肽合成(SPPS):帶特定修飾基團(tuán)
蛋白激活/修飾:通過NHS化、Mal化、碘化處理
偶聯(lián)反應(yīng)條件優(yōu)化:
緩沖:PBS、MES、Borate等
溫度:常溫或4℃反應(yīng)
比例:通常肽:蛋白=10:1 ~ 100:1
純化與驗(yàn)證:
透析、SEC除去游離肽
SDS-PAGE、質(zhì)譜確認(rèn)偶聯(lián)
6. 應(yīng)用示例
OVA-RGD肽:用于T細(xì)胞活化模型
BSA-多肽抗原:制備單克隆抗體
IgG-穿膜肽:細(xì)胞靶向遞送藥物
HRP-標(biāo)記肽:ELISA檢測(cè)系統(tǒng)
產(chǎn)地:西安pg電子官方生物
用途:科研
關(guān)于我們:
西安pg電子官方生物科技有限公司專注于功能化玻片,脂質(zhì)體,納米材料,熒光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素類試劑、共聚物及光電功能材料等各種科研材料的定制合成服務(wù)。
以上資料由pg電子官方生物小編zhn提供,僅用于科研
相關(guān)推薦:
4-arm-PEG-SG,四臂PEG戊二酸琥珀酰酯
二苯基環(huán)辛炔DBCO-PEG-DSPE MW:3400
OPSS-PEG-OH,羥基PEG巰基吡啶
mPEG-NH2,mPEG-Amine,甲氧基PEG氨基,MW:550
FITC-PEG-NHS,熒光素活性酯化PEG,MW:5000
mPEG-FITC,甲氧基聚乙二醇熒光素
DSPE-PEG-OH,MW:5000
CY5-PEG-NHS,菁染料PEG活性酯
FITC-PEG-NH2,熒光素聚乙二醇氨基