蛋白偶聯(lián)肽定制技術(shù)

蛋白-多肽偶聯(lián)技術(shù)在疫苗開發(fā)、靶向治療、傳感探針等方面有著重要用途。通過化學(xué)交聯(lián)方式將功能性肽段與大分子蛋白質(zhì)結(jié)合，可提升肽類的穩(wěn)定性、靶向性和體內(nèi)活性。

1. 蛋白偶聯(lián)方式

EDC/NHS活化法：羧基活化與氨基縮合，是常用的蛋白-肽共價(jià)偶聯(lián)方式；

馬來酰亞胺-巰基反應(yīng)：蛋白修飾馬來酰亞胺，結(jié)合巰基化多肽；

Click化學(xué)（疊氮-炔）：在溫和條件下進(jìn)行，生物相容性好；

酶促偶聯(lián)：轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、Sortase A 等酶可進(jìn)行位點(diǎn)特異性共價(jià)連接；

生物素-親和素橋聯(lián)：用于免疫診斷與傳感器。

2. 合成示例（EDC/NHS法）

蛋白（如BSA）羧基活化：加入EDC/NHS；

加入含N端胺基或賴氨酸側(cè)鏈的肽段；

反應(yīng)24 h于緩沖體系中（pH 67）；

透析去除游離肽，進(jìn)行PAGE/SDS驗(yàn)證；

3. 應(yīng)用方向

疫苗載體：多肽抗原接枝到BSA/OVA上作為佐劑；

靶向診斷探針：肽段引導(dǎo)功能蛋白（如HRP、熒光蛋白）靶向識別；

藥物前體構(gòu)建：多肽導(dǎo)向蛋白質(zhì)藥物遞送；

多肽修飾酶：賦予酶分子新功能（細(xì)胞穿透、組織定位等）；

4. 定制選項(xiàng)

蛋白種類：BSA、OVA、HSA、HRP、抗體、納米抗體等；

偶聯(lián)方式：C末/N末、賴氨酸、半胱氨酸等；

修飾密度、偶聯(lián)效率調(diào)節(jié)；

可協(xié)助實(shí)現(xiàn)多組分功能修飾（熒光+肽+蛋白）三元體系。

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