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          BSA-FITC(熒光素標記牛血清白蛋白)的合成制備
          發(fā)布時間:2025-06-26     作者:zhn   分享到:

          BSA-FITC(熒光素標記牛血清白蛋白)合成制備

          中文名稱:FITC標記牛血清白蛋白
          英文名稱:BSA-FITC(Bovine Serum Albumin-Fluorescein)
          別名:FITC-BSA、熒光牛血清蛋白

          供應商:西安pg電子官方生物科技有限公司

          用途:科研


          一、反應原理:

          FITC(異硫氰酸熒光素)具有活潑的異硫氰酸基團,可與蛋白質(zhì)賴氨酸殘基的氨基反應,生成穩(wěn)定的硫脲鍵,從而將熒光團共價連接至蛋白上。


          二、原料準備:

          BSA:常用濃度為10 mg/mL,在0.1 M NaHCO?緩沖液中(pH 8.5)溶解;

          FITC:在DMSO或乙醇中新鮮配制(常用濃度為1–10 mg/mL);

          緩沖液:0.1 M NaHCO?或PBS(pH 8.5)


          三、合成步驟:

          反應配比

          按BSA與FITC摩爾比1:3~1:10配制反應體系(根據(jù)標記密度需求調(diào)整);

          在避光條件下緩慢滴加FITC至BSA溶液中,并輕微攪拌。

          孵育反應

          反應通常在4°C或室溫避光下進行4–12小時;

          控制pH在8.0–8.5,有利于反應效率,防止蛋白質(zhì)變性。

          純化處理

          反應后需用透析袋(10 kDa)進行48小時透析,更換PBS緩沖液3–4次以去除游離FITC;

          也可使用凝膠層析柱(如Sephadex G-25)進行分離。

          檢測與儲存

          用UV-VIS分光光度計測定FITC吸收峰(495 nm)與蛋白280 nm吸收比值,計算標記密度(FITC/BSA);

          建議冷凍(-20°C)避光保存,加入0.01% NaN?防止微生物污染。


          四、應用與優(yōu)勢:

          應用:

          細胞攝取實驗:用于示蹤蛋白質(zhì)攝取與分布;

          免疫組化:作為非特異性對照蛋白;

          熒光成像:觀察蛋白質(zhì)運輸、血腦屏障通透性等;

          載藥或納米材料示蹤:例如FITC-BSA納米粒;

          優(yōu)勢:

          熒光強度高,綠色可視化清晰;

          BSA為天然蛋白,生物相容性優(yōu);

          標記工藝成熟,重復性強。

           BSA-FITC

           

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          以上資料由小編zhn提供,僅用于科研

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