外泌體可以作為**或者基因**的載體。并且，外泌體具有穿越生物屏障的能力，例如外泌體能夠繞過血腦屏障并將負(fù)荷物**地運輸?shù)酱竽X中。因此，基于外泌體的**有可能為各種疾病特別是腦相關(guān)疾病提供**。然而，目前還缺乏**的技術(shù)手段檢測**過程中外泌體的分布，特別是深層次腦部結(jié)構(gòu)中的外泌體成像檢測。

一種基于葡萄糖包被的納米金顆粒(Gold Nanoparticle, GNP)標(biāo)記和計算機(jī)斷層掃描成像的非侵入性體內(nèi)神經(jīng)成像和追蹤外泌體的方法。同時，研究表明葡萄糖包被的GNP通過葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白GLUT-1介導(dǎo)內(nèi)吞進(jìn)入MSC外泌體中，并且該內(nèi)吞途徑依賴于能量。該研究進(jìn)一步確定了GNP尺寸以及給藥方式：5 nm GNP能夠增強外泌體標(biāo)記；與靜脈注射相比，鼻內(nèi)給藥具有更為**的腦部積累效果，從而增強體內(nèi)神經(jīng)成像。此外，與健康小鼠大腦相比，非侵入性鼻內(nèi)給予的GNP標(biāo)記的外泌體在局灶性腦缺血的小鼠病變部位的積累**增加。因此，這種外泌體標(biāo)記技術(shù)可以作為各種腦疾病的強大的診斷工具，并且可能潛在地增強基于外泌體的神經(jīng)元恢復(fù)**。

**，該研究進(jìn)行了葡萄糖包被的GNP標(biāo)記外泌體的工作(圖1)。該研究制備了5nm和20nm兩種尺寸的GNP，然后進(jìn)行了葡萄糖的包被。同時提取了MSC細(xì)胞來源外泌體，并進(jìn)行了外泌體數(shù)量、濃度、直徑的檢測。然后，在37℃，3h的孵育條件下，進(jìn)行外泌體的GNP標(biāo)記。接著，對GNP標(biāo)記的外泌體進(jìn)行了發(fā)光、尺寸以及Zeta勢能指標(biāo)的檢測，確定GNP標(biāo)記的外泌體的物理特性。

圖1 葡萄糖包被的GNP標(biāo)記的外泌體物理特性的檢測

然后，探索了GNP標(biāo)記外泌體的機(jī)制（圖2）。利用火焰原子吸收光譜（FAAS）法，分別從反應(yīng)的溫度條件、納米金包被材料、納米金顆粒大小、外泌體膜蛋白等幾個方面對GNP標(biāo)記外泌體的機(jī)制進(jìn)行了探索。結(jié)果顯示，37℃相比4℃的反應(yīng)條件，外泌體被GNP標(biāo)記的效率更高，表明外泌體內(nèi)化GNP依賴于能量的方式。其次，發(fā)現(xiàn)葡萄糖包被材料，相比于非葡萄糖包被材料（mPEG）,顯示出更高的外泌體標(biāo)記效率，表明GNP標(biāo)記外泌體的標(biāo)記效率依賴于包被材料。其次，通過蛋白酶K處理破壞外泌體膜蛋白，能夠**降低外泌體的標(biāo)記效率，表明外泌體膜蛋白參與GNP的標(biāo)記過程。接著，該研究進(jìn)一步確定了葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白GLUT-1直接介導(dǎo)了GNP標(biāo)記外泌體的過程。此外，還發(fā)現(xiàn)5nm的GNP相比于20nm，具有更高的標(biāo)記效率。

圖2 影響GNP標(biāo)記外泌體效率的機(jī)制研究

接著，進(jìn)行了GNP標(biāo)記的外泌體體內(nèi)成像實驗，探索GNP標(biāo)記外泌體的應(yīng)用前景（圖3）。**探索了給藥途徑對腦部GNP外泌體積累的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，鼻腔內(nèi)給藥相比靜脈注射，具有更好的腦部積累效果。

圖3 給藥方式對腦部GNP標(biāo)記外泌體成像的影響

然后，針對GNP標(biāo)記的MSC外泌體的靶向性進(jìn)行了研究（圖4）。結(jié)果顯示，相比于健康小鼠，非侵入性鼻內(nèi)給予的GNP標(biāo)記的外泌體在局灶性腦缺血的小鼠病變部位的積累增加更加**。

圖4 GNP標(biāo)記的MSC外泌體可以靶向腦損傷組織部位

通過外泌體熒光標(biāo)記，對GNP標(biāo)記的外泌體成像結(jié)果進(jìn)行了驗證，從而進(jìn)一步確定了GNP標(biāo)記外泌體進(jìn)行腦部外泌體成像技術(shù)的可靠性。

西安pg電子官方生物科技有限公司有自己的獨立有機(jī)合成實驗室，可以自主生產(chǎn)合成各種無機(jī)納米材料，我們可以合成從零維/一維/二維/三維四個分類來提供幾十個產(chǎn)品分類和幾千種納米材料，以及他們的氧化物或碳化物及復(fù)合定制材料等等，我公司自產(chǎn)的產(chǎn)品純化純度高達(dá)98%+以上并可以提供液相圖譜來佐證純度，并且提供相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)服務(wù)。

相關(guān)定制產(chǎn)品列表

樹形分子包裹的金納米顆粒GNP

納米金(Nano-gold,NG)修飾玻碳電極(GCE)

C18鍵合納米金修飾二氧化硅顆粒

納米金修飾聚苯胺(PANI)復(fù)合材料

納米金修飾葡萄糖氧化酶復(fù)合材料

血紅蛋白/納米金修飾離子液體

聚多巴胺-納米金修飾玻碳電極(PDA-AuNPs/GCE)

納米金(nano-Au)固載甲胎蛋白抗體(anti-AFP)

離子液體包裹納米金修飾

碳包裹納米金屬粒子

高分子脂質(zhì)體包裹的納米金(LADL@Au NPs)

介孔二氧化硅包裹的正電荷納米金

聚乙烯亞胺/聚乙二醇修飾納米金顆粒

負(fù)載釓釓螯合劑DOTA-NHS的樹狀大分子包裹的納米金顆粒

環(huán)糊精修飾的樹狀大分子包裹的納米金

聚乙二醇化樹狀大分子包裹的納米金顆粒

RGD多肽修飾的多功能樹狀大分子包裹的納米金顆粒

透明質(zhì)酸包裹的金納米粒子

殼聚糖包裹納米金粒子

泛影酸/葉酸修飾的多功能樹狀大分子包裹的納米金顆粒Au DENPs

靶向脂質(zhì)體包裹水相納米金復(fù)合物

殼聚糖改性聚氨酯及殼聚糖包裹納米金

葉酸修飾的多功能靶向造影劑磁性氧化鐵/金納米顆粒

葉酸修飾的復(fù)合泛影酸的聚酰胺-胺樹狀大分子金納米粒子

檸檬酸根包裹的納米金顆粒

金納米顆粒功能化二硫化鉬納米復(fù)合材料

溶菌酶功能化金納米顆粒材料

魯米諾及衍生物功能化的金納米材料

DNA功能化的金納米顆粒

苝酰亞胺功能化的金/銀納米顆粒

杯芳烴功能化金納米顆粒

賴氨酸修飾的苝酰亞胺功能化金納米顆粒

多層殼包覆的功能化金納米顆粒

乳糖酸修飾的低代數(shù)PAMAM包裹金納米顆粒

硫辛酸功能化的金納米顆粒

樹枝化聚苯/金復(fù)合納米粒子

功能化Pd@Au納米顆粒

抗氧化配基功能化的金納米復(fù)合物

功能化金剛石納米顆粒

多肽功能化金納米顆粒

納米金顆粒包裹的PEG功能化PAMAM樹狀大分子

金納米顆粒修飾的硫酚功能化石墨烯復(fù)合材料

葉酸修飾的多功能靶向造影劑磁性氧化鐵/金復(fù)合納米顆粒

三聯(lián)吡啶衍生物配體與β-二酮稀土配合物包覆金納米顆粒

金納米顆粒修飾的多壁碳納米管(MWCNTs)

多官能團(tuán)表面修飾金屬納米顆粒

碳納米管/聚苯胺/納米金復(fù)合材料

配位鍵修飾的功能性納米顆粒/氧化石墨烯納米雜化材料

牛血清白蛋白修飾納米金顆粒

金納米顆粒功能化還原氧化石墨烯(RGO)和多壁碳納米管(MWCNTs)

鉑修飾的枝狀金納米復(fù)合材料

C18鍵合納米金修飾二氧化硅顆粒

石墨烯(GS)-殼聚糖(CS)-納米金(Nano-Au)復(fù)合材料

納米金(Au)包被瘦肉精-牛血清蛋白(CLB-BSA)

納米金修飾羧甲基殼聚糖

納米金修飾乙酰膽堿酯酶

柔紅霉素修飾的納米金

金納米顆粒復(fù)合材料(ssDNA-AuNPs);Hyaluronic Acid-DNA透明質(zhì)酸修飾脫氧核糖核酸

二氧化硅包裹金納米顆粒

氨基、羧基功能化的納米金試劑

PEG包裹的納米金顆粒（PEG末端鏈接不同基團(tuán)）

BSA包裹的納米金顆粒

葡聚糖包裹的納米金顆粒

氨基功能化的金納米粒子

羧基功能化的金納米粒子

聚乙烯亞胺包裹納米金（PEI-nanogold）

氧化氣氛下氧化鈦包裹金納米顆粒

金納米離子包裹二氧化硅殼核材料

紅細(xì)胞膜包被金納米顆粒

11-巰基十一烷酸包裹的金納米顆粒

單分散性PEG修飾金納米顆粒

納米金顆粒標(biāo)記外泌體

葡萄糖包被的納米金顆粒(Gold Nanoparticle, GNP）

納米金顆粒標(biāo)記外泌體

氧化硅修飾的納米金

D-丙氨酰-D-丙氨酸(D-alanyl-D-alanine，DADA)修飾金納米顆粒（Au_DADA）復(fù)合材料

zzj 2021.3.16