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          PI單染色法原理及操作步驟
          發(fā)布時(shí)間:2021-01-20     作者:zzj   分享到:

          熒光染料PI(碘化丙啶)是一種可對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑,常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),英文全稱是Propidium Iodide。它是一種溴化乙啶的類似物,在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。盡管PI不能通過(guò)活細(xì)胞膜,但卻能穿過(guò)破損的細(xì)胞膜而對(duì)核染色。PI經(jīng)常被用來(lái)與Calcein-AM或者FDA等熒光探針一起使用,

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          PI單染色法實(shí)驗(yàn)步驟

          1. 收集細(xì)胞{數(shù)目約(1~ 5)×106個(gè)/mL},500 ~ 1000 r/min離心5min,棄去培養(yǎng)液。

          2. 3ml PBS洗滌1次。

          3. 離心去PBS,加入冰預(yù)冷的70%的乙醇固定,4℃,1—2小時(shí)。

          4. 離心棄去固定液,3mlPBS重懸5min。

          5. 400目的篩網(wǎng)過(guò)濾1次,500—1000r/min離心5min,棄去PBS。

          6. 用1ml PI染液染色,4℃避光30min。

          7. 流式細(xì)胞儀檢測(cè):PI用氬離子激發(fā)熒光,激光光波波長(zhǎng)為488nm,發(fā)射光波波長(zhǎng)大于630nm,產(chǎn)生紅色熒光分析PI熒光強(qiáng)度的直方圖也可分析前散射光對(duì)側(cè)散射光的散點(diǎn)圖。


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          以上內(nèi)容來(lái)自pg電子官方小編 zzj2021.1.20

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