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          熒光標(biāo)記多糖衍生物的研究進(jìn)展
          
						
          
							發(fā)布時(shí)間：2020-09-14     作者：zhn   分享到：
							
          
								
          
								
							
          
						
          
						
          
						
          熒光標(biāo)記多糖衍生物的研究進(jìn)展

          糖具有抗**、提高免疫力等多種生物學(xué)活性,是國(guó)內(nèi)外研究的重要**來源.由于多糖沒有光吸收的基團(tuán),無法直接通過熒光分光光度計(jì)等設(shè)備檢測(cè),因而將多糖進(jìn)行熒光標(biāo)記成為檢測(cè)多糖的重要方法.熒光標(biāo)記技術(shù)分析多糖能夠具有較高的靈敏度和選擇性,其中異硫氰酸熒光素(FITC)在生化研究中應(yīng)用較為廣泛.目前關(guān)于FITC標(biāo)記多糖的研究頗為豐富,本文對(duì)相關(guān)研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述. 
          QQ截圖20201117153118.png

          1.應(yīng)用
          熒光標(biāo)記的葡聚糖和其他多糖的衍生物，主要用于細(xì)胞和組織的滲透性和傳導(dǎo)研究。熒光檢測(cè)的另一個(gè)好處是，提供健康組織對(duì)應(yīng)病變組織的滲透性定量數(shù)據(jù)。配合螢光顯微鏡檢查實(shí)時(shí)同步進(jìn)行。該技術(shù)具有高靈敏度，即使組織液中樣本濃度低至1μg/ml，仍可檢測(cè)出。其他應(yīng)用領(lǐng)域還包括**傳遞和微循環(huán)研究。熒光多糖衍生物也可以作為分子標(biāo)志物，用于科研用試劑盒。經(jīng)羧甲基(CM)或二乙基氨基乙(DEAE)修飾的熒光多糖，可用于研究電荷對(duì)滲透性的影響。賴氨酸修飾的衍生物為生物結(jié)合和固定提供了工具，可用于細(xì)胞和與之類似的組織保存。
          2.微血管流量和腎小球?yàn)V過研究：
          使用TdB的150KDa TRITC標(biāo)記葡聚糖（紅色，用于微血管流量）和4KDa FITC標(biāo)記葡聚糖（綠色，用于腎小球?yàn)V過），可以觀測(cè)活體大鼠腎臟的微循環(huán)血流量和腎小球透過。視頻開始部分展示的是位于周遭小管中間和交叉部位的腎小球（橙色），細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞核呈青色。先緩慢注入分子量大的150 kDa TRITC標(biāo)記葡聚糖，熒光強(qiáng)度隨著該物質(zhì)在血流中擴(kuò)散均勻分布逐漸變強(qiáng)繼而出現(xiàn)峰值。平衡后，注入分子量較小的4kDa FITC標(biāo)記葡聚糖，快速通過腎小球?yàn)V過膜的屏障，沿著圍繞腎小球近端的小管移動(dòng)。
          3.產(chǎn)品組合：
          ATTO(TM)標(biāo)記產(chǎn)品：
          TdB提供ATTO488?(502nm/524nm) and ATTO647n? (646 nm/664 nm)標(biāo)記的多糖衍生物。ATTO染料具備吸收強(qiáng)，光量子產(chǎn)率高和光穩(wěn)定性強(qiáng)的特點(diǎn)。
          FITC標(biāo)記產(chǎn)品：FITC衍生物已用于多種生物應(yīng)用超過40年。TdB生產(chǎn)平均分子量 4 kDa到2000 kDa的寬譜FITC-多糖衍生物產(chǎn)品 (490 nm/520 nm)。產(chǎn)品線包括葡聚糖、聚蔗糖、菊粉和其它多糖衍生物。

          TRITC標(biāo)記產(chǎn)品：TRITC衍生物 (550 nm/572 nm)包括了葡聚糖、透明質(zhì)酸和聚蔗糖的衍生物。includes derivatives of dextran, hyaluronic acid and polysucrose. TdB生產(chǎn)分子量 4 kDa到2000 kDa 的TRITC-衍生物。與FITC相比，TRITC衍生物 pH依賴性較小。
          4.熒光基團(tuán)
          產(chǎn)品線由超過30種不同產(chǎn)品構(gòu)成，其中21種是帶熒光標(biāo)記的 。提供多種不同熒光基團(tuán)標(biāo)記的葡聚糖和其它多糖衍生物。其中包括為人熟識(shí)的FITC標(biāo)記（493nm/518nm）和TRITC標(biāo)記（550nm/572 nm），其用于滲透率研究的歷史已經(jīng)超過40年。產(chǎn)品目錄中還包括ATTO?-染料ATTO488標(biāo)記 (502 nm/524 nm) 和ATTO647N標(biāo)記 (46 nm/664 nm), 適合單分子檢測(cè)。還提供特有的紅移Antonia Red?標(biāo)記 (583 nm/602 nm), 帶有明亮的熒光，優(yōu)越的化學(xué)和光穩(wěn)定性，并且對(duì)pH沒有依賴性。
          5.質(zhì)量
          所有TdB提供的多糖衍生物都具有低的聚合分散度（PD）,意味著Mw/Mn之比接近于1。對(duì)于滲透性研究而言尤為重要，較低的聚合分散度使結(jié)果更為可靠，重現(xiàn)性更好。TdB熒光標(biāo)記葡聚糖衍生物在聚合分散性方面優(yōu)于競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手，詳參“Multiple factors influence glomerular albumin permeability in rats.” RM Sandoval et al., J Am Soc Nephrol, 2012 Mar, 23(3)447-57。



          
						
          
						
          
							
							
						
          
					
          
				
          
			
          
		
          
	
          

    







          
		
          
			
			
			
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