西安pg電子官方生物**供應(yīng)一系列的凝集素;同時(shí)提供各種熒光標(biāo)記修飾偶聯(lián)的凝集素。提供羅丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、瓊脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red標(biāo)記各種凝集素。
菜豆凝集素(Phaseolus vulgaris凝集素)是一個(gè)凝集素家族的名稱,每個(gè)家族都由四個(gè)亞基組成。有兩種不同類型的亞單位。其中一種主要參與紅細(xì)胞凝集,并被指定為“E”亞單位(用于紅細(xì)胞凝集素)。另一種類型參與淋巴細(xì)胞凝集和有絲分裂活性,被稱為“L”亞單位(白血球凝集素)。這些亞單位結(jié)合起來產(chǎn)生五個(gè)隔離素。
PHA-E具有較強(qiáng)的血凝活性,但是一種弱的有絲分裂原。PHA-L具有四個(gè)L型亞單位,不凝集紅細(xì)胞,但是一種有*的有絲分裂原。其他三個(gè)分離蛋白,分別命名為E3L1、E2L2和E1L3,具有與各自的E或L亞單位數(shù)量成比例的紅凝集和有絲分裂活性。我們將五種隔離素的混合物稱為PHA(E+L)。
FITC標(biāo)記凝集素的組織化學(xué)染色程序
1.組織切片經(jīng)脫蠟處理,若是Bouin液固定的組織,用70%乙醇洗3次除去組織切片內(nèi)的黃色后,再用蒸餾水漂洗;
2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分鐘;
3.加入FITC-凝集素(PBS適當(dāng)*釋),置濕盒內(nèi)孵育,室溫1小時(shí);
4.PBS漂洗3次,每次5分鐘;
5.水溶性封片劑封片,熒光顯微鏡觀察。
6.結(jié)果 FITC標(biāo)記的凝集素能直接與組織細(xì)胞內(nèi)的糖基結(jié)合,從而顯示糖基的位置,可用于檢測組織細(xì)胞中的糖成分,陽性部位呈黃綠色熒光。
注意事項(xiàng)
(1)固定液:以Bouin固定液為佳,也可用70%乙醇固定;
(2)與其他組織化學(xué)方法一樣,染色過程中,應(yīng)始終保持一定濕度,使切片保持濕潤狀態(tài);
(3)需經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定FITC-凝集素的*佳工作濃度;
(4)凝集素的活性部位需重金屬離子維持,故可用TBS作為緩沖液,加微量的金屬(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1.0mmol/L),可增強(qiáng)凝集素的結(jié)合能力。
相關(guān)產(chǎn)品
未結(jié)合紅細(xì)胞凝集素(PHA-E) PHA-E
熒光素標(biāo)記菜豆紅細(xì)胞凝集素(PHA-E) fitc-PHA-E
生物素修飾菜豆紅細(xì)胞凝集素(PHA-E) Biotin生物素-PHA-E
可以根據(jù)文獻(xiàn)制備特殊定制類產(chǎn)品。(ysl2022.4.26.)
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