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          FITC-ECL,ECA;熒光素標(biāo)記的雞冠刺桐凝集素(ECL,ECA),F(xiàn)luorescein labeled Erythrina Cristagalli Lectin (ECL, ECA)
          發(fā)布時(shí)間:2022-04-26     作者:ysl   分享到:

          西安pg電子官方生物**供應(yīng)一系列的凝集素;同時(shí)提供各種熒光標(biāo)記修飾偶聯(lián)的凝集素。提供羅丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、瓊脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red標(biāo)記各種凝集素。

          雞冠刺桐凝集素(ECL,ECA)結(jié)合的碳水化合物結(jié)構(gòu)常見于哺乳動(dòng)物來源的膜和血清糖蛋白中。這種結(jié)構(gòu)上的唾液酸取代似乎阻止了凝集素的結(jié)合。這種特異性為利用瓊脂糖結(jié)合ECL分離或分離哺乳動(dòng)物糖蛋白提供了機(jī)會(huì)。

          熒光素標(biāo)記的刺桐凝集素具有適當(dāng)數(shù)量的熒光色素結(jié)合,為該凝集素提供*的染色特性。這種共軛物基本上不含未結(jié)合的熒光色素。激發(fā)值為495 nm,發(fā)射值為515 nm。

          FITC標(biāo)記凝集素的組織化學(xué)染色程序

          1.組織切片經(jīng)脫蠟處理,若是Bouin液固定的組織,用70%乙醇洗3次除去組織切片內(nèi)的黃色后,再用蒸餾水漂洗;

          2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分鐘;

          3.加入FITC-凝集素(PBS適當(dāng)*釋),置濕盒內(nèi)孵育,室溫1小時(shí);

          4.PBS漂洗3次,每次5分鐘;

          5.水溶性封片劑封片,熒光顯微鏡觀察。

          6.結(jié)果 FITC標(biāo)記的凝集素能直接與組織細(xì)胞內(nèi)的糖基結(jié)合,從而顯示糖基的位置,可用于檢測(cè)組織細(xì)胞中的糖成分,陽性部位呈黃綠色熒光。

          注意事項(xiàng)

          (1)固定液:以Bouin固定液為佳,也可用70%乙醇固定;

          (2)與其他組織化學(xué)方法一樣,染色過程中,應(yīng)始終保持一定濕度,使切片保持濕潤(rùn)狀態(tài);

          (3)需經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定FITC-凝集素的*佳工作濃度;

          (4)凝集素的活性部位需重金屬離子維持,故可用TBS作為緩沖液,加微量的金屬(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1.0mmol/L),可增強(qiáng)凝集素的結(jié)合能力。

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