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          FITC-GSL I熒光素標(biāo)記的西非單葉豆凝集素 I,F(xiàn)luorescein labeled Griffonia (Bandeiraea) Simplicifolia Lectin I (GSL I, BSL I)
          發(fā)布時(shí)間:2022-04-26     作者:ysl   分享到:

          西安pg電子官方生物**供應(yīng)一系列的凝集素;同時(shí)提供各種熒光標(biāo)記修飾偶聯(lián)的凝集素。提供羅丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、瓊脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red標(biāo)記各種凝集素。

          FITC-GSL I熒光素標(biāo)記的西非單葉豆凝集素 I Fluorescein labeled Griffonia (Bandeiraea) Simplicifolia Lectin I (GSL I, BSL I) GSLⅠ是一個(gè)分子量約為114kda的糖蛋白家族。有兩種亞單位,稱為A和B,分子量略有不同。這些亞基結(jié)合形成四聚體結(jié)構(gòu),形成五個(gè)分離蛋白。富含A的凝集素優(yōu)先凝集血型A紅細(xì)胞,因此似乎對(duì)α-N-乙酰半乳糖胺殘基具有特異性,而富含B的凝集素優(yōu)先凝集血型B細(xì)胞,并且對(duì)α-半乳糖殘基具有特異性。我們的GSL I是五種隔離物的混合物。據(jù)報(bào)道,GSL-I與包括層粘連蛋白在內(nèi)的多種糖蛋白結(jié)合。 熒光素標(biāo)記的GSL-I具有適當(dāng)數(shù)量的熒光色素結(jié)合,為該凝集素提供**的染色特性。這種共軛物基本上不含未結(jié)合的熒光色素。 激發(fā)**值為495nm 發(fā)射**值為515nm

          FITC標(biāo)記凝集素的組織化學(xué)染色程序

          1.組織切片經(jīng)脫蠟處理,若是Bouin液固定的組織,用70%乙醇洗3次除去組織切片內(nèi)的黃色后,再用蒸餾水漂洗;

          2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分鐘;

          3.加入FITC-凝集素(PBS適當(dāng)*釋),置濕盒內(nèi)孵育,室溫1小時(shí);

          4.PBS漂洗3次,每次5分鐘;

          5.水溶性封片劑封片,熒光顯微鏡觀察。

          6.結(jié)果 FITC標(biāo)記的凝集素能直接與組織細(xì)胞內(nèi)的糖基結(jié)合,從而顯示糖基的位置,可用于檢測組織細(xì)胞中的糖成分,陽性部位呈黃綠色熒光。

          注意事項(xiàng)

          (1)固定液:以Bouin固定液為佳,也可用70%乙醇固定;

          (2)與其他組織化學(xué)方法一樣,染色過程中,應(yīng)始終保持一定濕度,使切片保持濕潤狀態(tài);

          (3)需經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定FITC-凝集素的*佳工作濃度;

          (4)凝集素的活性部位需重金屬離子維持,故可用TBS作為緩沖液,加微量的金屬(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1.0mmol/L),可增強(qiáng)凝集素的結(jié)合能力。

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