熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)的分布特點(diǎn)：

在用熒光技術(shù)檢測(cè)內(nèi)源性蛋白質(zhì)時(shí)*常用的方法就是免疫學(xué)方法，即先用特異性抗體(- -抗)識(shí)別靶蛋白，再用標(biāo)記有小分子有機(jī)染料、藻膽蛋白或量子點(diǎn)的:抗顯色(圖1A至C)。

或者，也可以直接將熒光標(biāo)志物或者生物素連接在一抗上,然后再用抗生物素蛋白鏈菌素檢測(cè)。

當(dāng)把抗體直接注入細(xì)胞時(shí)或者為了對(duì)多個(gè)蛋自進(jìn)行檢測(cè)而使用了多種顏色的熒光時(shí)采用這種直接將標(biāo)志物連接在抗體上的方法非常**。但是如果沒(méi)有高質(zhì)*的抗體時(shí)*好就是將熒光標(biāo)志物與靶蛋白一起融合表達(dá)來(lái)檢測(cè)，盡管這種融合蛋白不能算真正意義上的“內(nèi)源性蛋白”。

對(duì)靶蛋白檢測(cè)的**程度取決于一抗的特 異性,因此還需要用其它的方法進(jìn)行佐證。

使用免疫熒光標(biāo)記法的劣勢(shì)在于前而所述的，該方法只能用于經(jīng)透化處理的細(xì)胞、胞外蛋白和可以被細(xì)胞內(nèi)吞的蛋白，而且這些抗體標(biāo)志物的多價(jià)性(multivalency) 還可能公導(dǎo)致靶蛋白形成寡聚體。

在標(biāo)準(zhǔn)的免疫標(biāo)記法中，熒光標(biāo)記的復(fù)合體通常米說(shuō)分子量都會(huì)超過(guò)200KD，這有可能會(huì)影響到蛋白間的相互識(shí)別過(guò)程。

表1中列舉了幾種免疫標(biāo)記法以及其它標(biāo)記蛋白的技術(shù)。

西安pg電子官方生物提供酶HRP，熒光FITC，Biotin、Cy3、Cy5、Cy7、羅丹明等熒光物質(zhì)標(biāo)記蛋白，標(biāo)記位置是氨基，標(biāo)記的蛋白有：牛血紅蛋白、膠原蛋白、鏈霉親和素、大鼠免疫球蛋白、牛胎球蛋白、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、重組蛋白G等幾十種蛋白，提供檢測(cè)圖譜。

四甲基羅丹明-5(6)-馬來(lái)酰亞胺（混合物）;

四甲基羅丹明-5-馬來(lái)酰亞胺（單一化合物）;cas174568-67-3;

四甲基羅丹明-6-馬來(lái)酰亞胺（單一化合物）;cas174568-68-4;

德克薩斯紅-X-琥珀酰亞胺酯;Texas red-X,SE

5(6)-羧基羅丹明110（混合物）;5(6)-CR110

5-羧基羅丹明110（單一化合物）;5-CR110

6-羧基羅丹明110（單一化合物）;6-CR110

5(6)-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯（混合物）;cas254732-34-8;5(6)-CR110, SE

5-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯（單一化合物）;5-CR110, SE

6-羧基羅丹明110琥珀酰亞胺酯（單一化合物）;6-CR110, SE

5(6)-羧基羅丹明6G（混合物）;5(6)-CR6G

5-羧基羅丹明6G（單一化合物）;5-CR6G

6-羧基羅丹明6G（單一化合物）;6-CR6G

5(6)-羧基羅丹明6G琥珀酰亞胺酯（混合物）;5(6)-CR6G, SE

5-羧基羅丹明6G琥珀酰亞胺酯（單一化合物）;5-CR6G, SE

6-羧基羅丹明6G琥珀酰亞胺酯（單一化合物）;6-CR6G, SE

5(6)-羧基四甲基羅丹明（混合物）;cas150347-56-1;5(6)-TAMRA

5-羧基四甲基羅丹明（單一化合物）;cas91809-66-4;5-TAMRA

6-羧基四甲基羅丹明（單一化合物） ;cas91809-67-5;6-TAMRA

5(6)-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯（混合物）;cas246256-50-8;5(6)-TAMRA, SE

5-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯（單一化合物）;cas150810-68-7;5-TAMRA, SE

6-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯（單一化合物）;cas150810-69-8;6-TAMRA, SE

以上資料來(lái)自小編zhn2022.03.11

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