許多寡聚物和多糖(包括paramylon)在滸苔蟲(chóng)的生命周期中至關(guān)重要，它們是由糖基轉(zhuǎn)移酶以u(píng)dp -葡萄糖為底物合成的。

在此，我們報(bào)道了一種擬在gracilis中編碼udp -葡萄糖焦磷酸化酶(EgrUDP-GlcPPase)的基因的分子克隆。在大腸桿菌中進(jìn)行外源表達(dá)后，對(duì)重組酶進(jìn)行了結(jié)構(gòu)和功能鑒定。

高度純化的EgrUDP-GlcPPase表現(xiàn)出單體結(jié)構(gòu)，能夠催化udp -葡萄糖的合成，Vmax為3350 U.mg?1。葡萄糖- 1p和UTP是**底物，但酶也使用(催化效率較低)TTP、半乳糖- 1p和甘露糖- 1p。

過(guò)氧化氫的氧化使酶失活，這種作用被二硫蘇糖醇或硫氧還蛋白的還原逆轉(zhuǎn)。由于在蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)中，7個(gè)半胱氨酸殘基的距離不夠近，無(wú)法形成二硫鍵，因此氧化還原過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生硫酸。

電泳研究表明，在氧化后，該酶排列在許多酶不活躍的結(jié)構(gòu)構(gòu)象;它們也在體內(nèi)被檢測(cè)到。最后，共聚焦熒光顯微鏡為胞質(zhì)(主要在鞭毛)酶的定位提供了證據(jù)。

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