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          UDP 糖|枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis 168) n端截短EpsC的體外特性研究
          發(fā)布時(shí)間:2022-01-12     作者:UDP 糖   分享到:

          枯草芽孢桿菌168 EpsC在SwissProt數(shù)據(jù)庫(kù)中被標(biāo)注為“Probable多糖生物合成蛋白”。

          epsC是eps操縱子的一部分,被認(rèn)為參與了胞外聚合物物質(zhì)(eps)的生物合成。本研究旨在確定EpsC的分子功能。

          序列分析EpsC建議一個(gè)跨膜域的存在。克隆并過(guò)表達(dá)2個(gè)n端缺失突變體,其中缺失1-89 (EpsC89)和1-115 (EpsC115)殘基。

          采用反相**液相色譜、表面等離子體共振(SPR)和吸收光譜研究酶活性和底物偏好。

          這些數(shù)據(jù)表明,EpsC在體外具有UDP-GlcNAc 4,6-脫水酶活性。

          純化的重組蛋白利用UDP-Glc和TDP-Glc也作為底物。

          此外,EpsC115可以利用UDP-Gal和UDP-GalNAc作為底物,而EpsC89只能結(jié)合這兩個(gè)糖核苷酸。

          這些結(jié)果表明,刪除一個(gè)更長(zhǎng)的n端地區(qū)擴(kuò)大底物特異性。

          這些拓寬的特異性可能是假定的跨膜結(jié)構(gòu)域缺失的結(jié)果,可能在體內(nèi)不存在。

          EpsC和氨基轉(zhuǎn)移酶EpsN (Kaundinya CR et al.,糖生物學(xué),2018)和乙酰轉(zhuǎn)移酶EpsM(未發(fā)表的數(shù)據(jù))似乎參與了N,N ' -二乙酰桿菌胺的生物合成。

          UDP-L-RhaNAcUDP-4n-D-FucNAc
          UDP-D-XylNAcUDP-VioNAc
          UDP-2-Biotinyl-GalNAcUDP-6-Biotinyl-GalNAc


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