環(huán)氧基修飾載玻片：

糖芯片技術(shù)是將糖鏈作為探針固定到載體上,用于檢測糖結(jié)合蛋白的一類生物芯片技術(shù)。

本實驗利用二硫蘇糖醇和碘乙酰胺依次處理原樣蛋白質(zhì)后,用胰蛋白酶進(jìn)行酶切.通過濾膜輔助法利用凝集素從上述酶切產(chǎn)物中提取含有特定糖鏈結(jié)構(gòu)的糖肽.利用糖肽N-端的氨基與環(huán)氧基團(tuán)的反應(yīng),將其共價固定到環(huán)氧化修飾的載玻片上,制備糖肽芯片.將Cy3標(biāo)記的蛋白質(zhì)樣本與糖肽芯片進(jìn)行孵育,掃描孵育后芯片上的熒光信號值,分析比較糖結(jié)合蛋白的變化.本實驗確定了制備糖肽芯片的**點樣緩沖液是pH9.3的0.1M的Na2C03緩沖液。

來源：[1]張志偉. 糖肽芯片檢測糖結(jié)合蛋白方法的建立及應(yīng)用[D]. 西北大學(xué), 2017.

文章涉及材料：

玻璃片基(76mm X 25mmX 1mm)

牛血清白蛋白(BSA)

Cy3

Cy5

凝集素LCA和ConA

環(huán)氧基修飾玻片

Cy3標(biāo)記的BSA

Cy3標(biāo)記核糖核酸酶B（RNaseB）

甘氨酸

十二烷基磺酸鈉(SDS)

溴酚藍(lán)

三羥甲基氨基甲烷(Tris)

丙烯酸胺

N,N-甲叉丙烯酸酯

凝集素包括木菠蘿凝集素(Jacalin)

太陽麻凝集素(Crotalaria)

植物血球凝集素P；Phytohaemagglutinin,(PHA)

蝸牛凝集素Helix Pomatia Agglutinin,(HPA)

麥胚凝集素Wheat germ agglutinin,(WGA）

花生凝集素Peanut agglutinin,(PNA）

大豆凝集素Soybean agglutinin,(SBA)

雙花扁豆凝集素(DBA）

荊豆凝集素Ulex Europaeus Agglutinin, (UEA-I)

小扁豆凝集素(LCA)

馬鈴薯凝集素(STL) ）

毛苕子凝集素Vicia villosa lectin (VVL, VVA)

番茄凝集素Lycopersicon Esculentum Agglutinin，LEA

兵豆凝集素Lens Culinaris Agglutinin(LcH)

橙黃網(wǎng)胞盤菌凝集素(AAL)

尾穗莧凝集素(ACL)

伴刀豆凝集素(ConA)

桑橙凝集素

槲寄生凝集素

紅腰果E型凝集素(PHA-E)

紅腰果L型凝集素(PHA-L)

豌豆凝集素(PSA)

蓖麻凝集素(RCA-I)

西澤接骨木凝集素(SNA)

槲寄生凝集素(VAL)

歐蔓陀羅凝集素(DSA)

喇叭水仙凝集素(NPA/NPl)

尾穗莧凝集素(ACA)

雪花蓮凝集素Galanthus Nivalis agglutinin, (GNA)

小編zhn2021.11.24