點(diǎn)擊化學(xué)又稱“鏈接化學(xué)”或“動(dòng)態(tài)組合化學(xué)”，指在通過小單元的拼接，來快速、可靠地完成各種類型分子的化學(xué)合成。該反應(yīng)尤其強(qiáng)調(diào)開辟以碳-雜原子鍵（C-X-C）合成為基礎(chǔ)的組合化學(xué)新方法，其代表反應(yīng)為銅催化的疊氮-炔基的環(huán)加成反應(yīng)。點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)有如下優(yōu)點(diǎn)：

（1）可在細(xì)胞內(nèi)發(fā)生，利于原位直接找到**作用靶點(diǎn)；

（2）合成反應(yīng)快速、副產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞無**；

（3）操作簡(jiǎn)單、條件溫和、對(duì)水與氧等環(huán)境。

通過有機(jī)合成的方式在活性分子上引入炔烴等生物正交基團(tuán)，在不影響其藥理活性的前提下合成得到功能化衍生物，隨后將該功能化衍生物與細(xì)胞共孵育，使其與靶標(biāo)蛋白結(jié)合，利用點(diǎn)擊反應(yīng)再將疊氮修飾的報(bào)告基團(tuán)（生物素或熒光）連接到探針-靶標(biāo)蛋白復(fù)合物上，進(jìn)而對(duì)靶標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)、富集和鑒定（圖1）

采用點(diǎn)擊化學(xué)的方式進(jìn)行靶點(diǎn)鑒定，通常需要3個(gè)步驟，具體包括：

（1）小分子探針的設(shè)計(jì)與合成，隨后將該探針與細(xì)胞共孵育后實(shí)現(xiàn)與靶蛋白的特定位點(diǎn)發(fā)生共價(jià)結(jié)合；

（2）通過點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，將已與靶蛋白發(fā)生共價(jià)結(jié)合的分子探針與報(bào)告基團(tuán)相連（圖2）；

（3）對(duì)所識(shí)別的靶標(biāo)進(jìn)行純化、富集和鑒定

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