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          普魯士藍(lán)染色液的三種染色方法及注意事項(xiàng)
          
						
          
							發(fā)布時(shí)間：2020-07-22     作者：axc   分享到：
							
          
								
          
								
							
          
						
          
						
          
						
          普魯士藍(lán)染色液的三種染色方法及注意事項(xiàng)
          普魯士藍(lán)反應(yīng)(Prussianblue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過(guò)亞鐵化鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常見(jiàn)于吞噬細(xì)胞或間質(zhì)內(nèi),生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三 價(jià)鐵的亞鐵化物。普魯士藍(lán)染色液主要用于顯示細(xì)胞中鐵離子,常見(jiàn)于吞噬細(xì)胞內(nèi),可以很好地區(qū)分含鐵血黃素與其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長(zhǎng)期保存、不易產(chǎn)生沉淀、應(yīng)用范圍廣, 可以進(jìn)行復(fù)染。
          普魯士藍(lán)染色液的三種染色方法及注意事項(xiàng) 
          普魯士藍(lán)細(xì)胞染色
          自備材料：
          1、固定液：10%中性福爾馬林、4%多聚甲醛等。
          2、系列乙醇
          普魯士藍(lán)三種染色種類及制備方法
          染色種類
          制備方法
          石蠟切片染色
          1、組織固定于10%中性福爾馬林，常規(guī)脫水包埋。
          2、切片厚度4μm，常規(guī)脫蠟至水。
          3、蒸餾水水洗 1min。
          4、切片入Perls stain(見(jiàn)注意事項(xiàng)2)，浸染15～30min。
          5、蒸餾水充分沖洗2～5min。
          6、入核固紅染色液，淡染細(xì)胞核5～10min。
          7、自來(lái)水沖洗1～5s。
          8、常規(guī)脫水透明，中性樹膠封固
          冰凍切片染色
          1、無(wú)需脫蠟，直接迅速用蒸餾水沖洗2～3min。
          2、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，時(shí)間可以相應(yīng)縮短。
          細(xì)胞染色
          1、4%多聚甲醛固定10～20min。
          2、自來(lái)水沖洗2次，每次2min。
          3、蒸餾水沖洗2次，每次2min。
          4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，時(shí)間可以相應(yīng)縮短
          普魯士藍(lán)染色注意事項(xiàng)：
          1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。組織固定常采用10%中性福爾馬林，經(jīng)普通福爾馬林長(zhǎng)期固定后，組織會(huì)有損傷。避免使用酸性固定劑，鉻酸鹽處理也會(huì)妨礙鐵的保存。
          2、整個(gè)操作過(guò)程中容器要干凈，避免用金屬鐵制品，洗切片和容器時(shí)以蒸餾水為宜，因普通水內(nèi)含鐵質(zhì)。Perls stain 染色時(shí)，應(yīng)根據(jù)樣本情況調(diào)整著色時(shí)間。
          3、所有切片都應(yīng)使用同一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照切片，選擇適合的對(duì)照非常重要。尸檢肺組織是一個(gè)很好的對(duì)照，包含相當(dāng)數(shù)量的鐵陽(yáng)性巨噬細(xì)胞(心衰細(xì)胞)。
          4、冰凍切片和細(xì)胞染色，根據(jù)具體情況摸索實(shí)驗(yàn)條件。
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