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如何驗(yàn)證色譜填料批次穩(wěn)定性？

發(fā)布時(shí)間：2021-06-24 作者：axc 分享到：

無論是分析型**液相色譜還是制備或生產(chǎn)型液相色譜，色譜柱和色譜填料的批次穩(wěn)定性都是異常重要的，因此色譜柱和色譜填料的批次穩(wěn)定性一直是使用者最擔(dān)心的問題。

證明色譜填料批次穩(wěn)定性有很多方法，可以從外形，物理方法、化學(xué)方法、柱效測(cè)試、小試上樣等，但是這中間很多方法都會(huì)受色譜柱裝填技術(shù)等制約，所以實(shí)現(xiàn)起來比較難。

而**方便快捷且可行性較好的判斷色譜柱和色譜填料批次穩(wěn)定性的方法就是考察標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試方法下的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間、相對(duì)保留時(shí)間和分離度。

靠譜的方法：

不同批次的色譜填料，各裝填一根小柱子，找一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)方法和標(biāo)準(zhǔn)品組合，比如柱效測(cè)試的混標(biāo)組合，或者常用模式蛋白組合，在不同批次色譜填料裝填的柱子上各運(yùn)行一個(gè)小進(jìn)樣量的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣，進(jìn)樣量以各標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)蛋白洗脫峰基線分離為宜。

然后就是對(duì)標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行結(jié)果的對(duì)比和判斷，**，判斷各標(biāo)準(zhǔn)品或模式蛋白在不同批次填料裝填的小柱子上的洗脫峰的保留時(shí)間是不是有明顯差異。

原則上如果不同批次的填料在裝柱前的量取、裝柱過程和結(jié)果沒有明顯差異的情況下，批次穩(wěn)定性好的填料的保留時(shí)間一致性很好。但是在填料裝柱量和裝柱效果存在一定差異的情況下，即使各標(biāo)準(zhǔn)品或模式蛋白的保留有所差異，由于他們?cè)谙嗤盍系谋Ａ粢蜃酉嗤�，因此各峰在不同批次填料預(yù)裝小柱上的相對(duì)保留應(yīng)該差異不明顯。

若發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試且徹底平衡的情況下，不同批次填料各標(biāo)準(zhǔn)品的相對(duì)保留有明顯變化或者分離度有明顯變化，說明不同批次填料之間穩(wěn)定性較差。

還有一個(gè)可以驗(yàn)證的方法就是針對(duì)純化工藝的驗(yàn)證，看不同批次填料小試純化結(jié)果的吻合度，尤其是看制備圖譜的重合度，重合度越高，批間穩(wěn)定性越好，反之亦反。

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