氨基活化偶聯(lián)介質(zhì)可用于各種含有羧基的親和配基（蛋白質(zhì)、多肽、糖等）的偶聯(lián)，。EAH-activated QZT4FF活化偶聯(lián)介質(zhì)以較高流速瓊脂糖凝膠為基質(zhì)，經(jīng)過一系列的活化步驟，形成活化氨基，在溫和的條件下就可以偶聯(lián)各種帶羧基的配基。EAH-activated QZT4FF活化介質(zhì)具有使用方便、偶聯(lián)條件溫和、偶聯(lián)效率高和應(yīng)用范圍廣的特點(diǎn)。

氨基活化介質(zhì)的理化性質(zhì)和產(chǎn)品特性如表1所示。

氨基活化偶聯(lián)介質(zhì)(EAH-activated)的應(yīng)用

EAH-activated活化偶聯(lián)介質(zhì)用于各種含有氨基的親和配基（蛋白質(zhì)、多肽、糖等）的偶聯(lián)。具體的操作步驟如下（以4 ml活化膠偶聯(lián)BSA為例）：

（1）將約4 ml EAH活化膠水洗3-5次后抽干，再用pH 4.5的稀HCl溶液清洗2次，抽干后將4 ml EAH活化膠（約3.0 g）加入到10 ml的反應(yīng)器（磨口三角瓶或離心管）中，備用。

（2）準(zhǔn)確稱取40 mg BSA溶于4.0 ml稀HCl，pH 4.5溶液，溶解完全后加入84 mg EDC.HCl，溶解完全后測(cè)量其pH是否為4.5，否則需調(diào)到4.5，備用。

（3）將BSA溶液加入到活化膠中，反應(yīng)溫度恒定在4℃或25℃，搖床中振蕩混合（離心管水平放置），轉(zhuǎn)速120 rpm，反應(yīng)時(shí)間24 h（反應(yīng)前1小時(shí)pH有明顯的下降，可在15、30、45、60 min時(shí)測(cè)量pH并加入適量0.1M NaOH調(diào)pH至4.5）。

（4）反應(yīng)停止后，靜置，取上清離心（1000 g，5 min，室溫），收集上清液用于未偶聯(lián)BSA的濃度分析，計(jì)算偶聯(lián)的BSA的配基密度；將其余料液轉(zhuǎn)移到G3砂芯漏斗中用去離子水清洗、抽干。

（5）封閉未反應(yīng)的EAH：一般不需要封閉，如需封閉未反應(yīng)的氨基，可在偶聯(lián)反應(yīng)后（注意是在清洗前）直接往反應(yīng)物中加入4.2 ml 1 M 乙酸（醋酸），繼續(xù)反應(yīng)4 h。反應(yīng)停止后將料液轉(zhuǎn)移到砂芯漏斗中抽干，用去離子水清洗。

（6）清洗

將制得的BSA瓊脂糖凝膠依次用5倍的去離子水、0.1 M 含0.5 M NaCl的乙酸-乙酸鈉緩沖液（pH 4.0）、去離子水、0.1M 含0.5 M NaCl的硼酸-四硼酸鈉緩沖液（pH 8.0）和去離子水充分洗滌（重復(fù)清洗3次），抽干，去除未反應(yīng)的配基。

（7）保存

制得的BSA親和介質(zhì)保存于4℃、20%乙醇溶液中。

備注：其他配基的偶聯(lián)方法與BSA類似，但反應(yīng)條件（溫度（4 ^oC至室溫）、時(shí)間（4-24 h）、配基加入量）需要根據(jù)配基的特性和應(yīng)用的需求進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。

注意事項(xiàng)：通常用稀鹽酸作為偶聯(lián)溶液，如果選用緩沖液要避免使用含有氨基、羧基、磷酸基的緩沖液。

西安pg電子官方生物提供各種含有氨基的小分子peg linker產(chǎn)品:

Amino-PEG3-aminecas:929-75-9

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Amino-PEG6-aminecas:76927-70-3

Amino-PEG7-aminecas:332941-25-0

Amino-PEG8-aminecas:82209-36-7

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Amino-PEG11-aminecas:479200-82-3

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NHBoc-PEG5-aminecas:189209-27-6

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NHBoc-PEG7-aminecas:206265-98-7

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NHBoc-PEG11-aminecas:890091-42-6

NHBoc-PEG2-aminecas:153086-78-3

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Azido-PEG23 aminecas:749244-38-0

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Azido-PEG7-aminecas:1333154-77-0

Azido-PEG8-aminecas:857891-82-8

Azido-PEG5-aminecas:516493-93-9

Azido-PEG6-aminecas:957486-82-7

Azido-PEG4-aminecas:951671-92-4

Azido-PEG1-aminecas:464190-91-8

Azido-PEG2-aminecas:166388-57-4

Azido-PEG3-aminecas:134179-38-7

AMINE-PEG4-OHcas:86770-74-3

H2N/Amino-PEG2-COOH cas:791028-27-8

H2N/Amino-PEG3-COOHcas:784105-33-5

H2N/Amino-PEG4-COOHcas:663921-15-1

H2N/Amino-PEG5-COOHcas:1191078-74-6

H2N/Amino-PEG6-COOHcas:905954-28-1

H2N/Amino-PEG8-COOHcas:756526-04-2

H2N/Amino-PEG9-COOHcas:1191079-83-0

H2N/Amino-PEG10-COOHcas:196936-04-6

H2N/Amino-PEG12-COOHcas:196936-04-6

H2N/Amino-PEG7-COOHcas:

H2N/Aminooxy-PEG3-acid HCl saltcas:1807540-79-9

H2N/Aminooxy-PEG4-acidcas:1807537-38-7

H2N/Aminooxy-PEG2-alcoholcas:185022-12-2

H2N/Aminooxy-PEG4-alcoholcas:106492-60-8

H2N/Aminooxy-PEG2-methanecas:54149-49-4

H2N/Aminooxy-PEG7-methanecas:1370698-27-3

H2N/Aminooxy-PEG8-methane HCl saltcas:2055024-52-5

H2N/Aminooxy-PEG3-t-butyl estercas:1835759-72-2

H2N/Aminooxy-PEG4-t-butyl estercas:2100306-82-7

H2N/Aminooxy-PEG3-methanecas:248275-10-7

H2N/Aminooxy-PEG3-thiol HCl saltcas:1200365-63-4

H2N/Aminooxy-PEG3-NH-Boccas:2062663-65-2

Aminooxy-PEG2-azidecas:1043426-13-6

Aminooxy-PEG4-azidecas:2100306-61-2

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