Cy3-labeled，CY3標(biāo)記的纖維蛋白的反應(yīng)步驟

產(chǎn)品名稱：Cy3-labeled，CY3標(biāo)記的纖維蛋白

純度：95%+

Cy3-labeled 纖維蛋白是將熒光染料CY3通過(guò)共價(jià)方式標(biāo)記到纖維蛋白分子上的衍生復(fù)合物，用于凝血網(wǎng)絡(luò)成像、材料構(gòu)建及分子定位分析。纖維蛋白是由纖維蛋白原（Fibrinogen）經(jīng)凝血酶作用后聚合形成的纖維狀蛋白質(zhì)，在pH中性或略偏堿的條件下穩(wěn)定，含有多種賴氨酸與酪氨酸殘基，可作為化學(xué)修飾位點(diǎn)。

CY3染料常以NHS酯活性形式參與偶聯(lián)，能夠與蛋白質(zhì)上的伯胺基形成穩(wěn)定酰胺鍵。標(biāo)記步驟一般包括以下幾個(gè)關(guān)鍵階段：

緩沖體系準(zhǔn)備：將纖維蛋白溶解于適合反應(yīng)的緩沖液中，常用的是碳酸鹽或磷酸鹽緩沖液（pH 8.3 左右），該環(huán)境利于NHS酯與氨基反應(yīng)，同時(shí)不影響蛋白空間結(jié)構(gòu)。

染料溶液配制：CY3-NHS酯溶于無(wú)水DMSO或DMF中，以防止水解失活，并保持其反應(yīng)活性。使用前需現(xiàn)配，避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。

偶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行：將CY3染料溶液逐滴加入纖維蛋白溶液中，并輕緩攪拌。在避光條件下反應(yīng)0.5至2小時(shí)，溫度控制在室溫或4°C，以防蛋白變性。

反應(yīng)終止與純化：可通過(guò)添加甘氨酸或Tris緩沖液中和未反應(yīng)的NHS酯，終止反應(yīng)后使用透析、超濾離心或凝膠過(guò)濾柱清除游離染料分子，獲得純化后的Cy3-纖維蛋白。

表征與驗(yàn)證：使用紫外-可見光譜檢測(cè)其550–555 nm處的吸收峰以確認(rèn)標(biāo)記成功，同時(shí)可通過(guò)SDS-PAGE結(jié)合熒光成像驗(yàn)證標(biāo)記蛋白條帶。

該方法可控制標(biāo)記密度，以實(shí)現(xiàn)既能保證熒光信號(hào)，又不干擾其聚合與交聯(lián)能力。標(biāo)記后的纖維蛋白常用于構(gòu)建熒光凝膠網(wǎng)絡(luò)、觀察組織模擬結(jié)構(gòu)或在微流控芯片中作為示蹤因子。

性狀：固體或液體

儲(chǔ)藏條件：-20°C干燥避光保存

包裝規(guī)格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

廠家：pg電子官方生物

關(guān)于我們

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