CY3-Mucin,CY3標(biāo)記黏蛋白的反應(yīng)機(jī)制
CY3標(biāo)記的黏蛋白(Cy3-Mucin)是通過化學(xué)偶聯(lián)方法將熒光染料CY3共價(jià)連接于黏蛋白分子上的標(biāo)記物。黏蛋白是一類高分子量的糖蛋白,具有豐富的糖基化修飾,結(jié)構(gòu)復(fù)雜且高度親水,存在于多種生物分泌物中,形成保護(hù)性黏液層。
反應(yīng)機(jī)制主要依賴于CY3活性酯(如NHS酯)與黏蛋白上的氨基或經(jīng)過修飾的羥基進(jìn)行的共價(jià)結(jié)合。黏蛋白自身含有多個(gè)賴氨酸殘基及氨基端,提供了酰胺鍵形成的主要位點(diǎn)。由于黏蛋白中糖基大量存在,其多羥基結(jié)構(gòu)也為其他化學(xué)修飾提供可能,通過氧化處理形成醛基后,可與含氨基的CY3衍生物通過席夫堿反應(yīng)偶聯(lián)。
偶聯(lián)過程通常在緩沖液中進(jìn)行,pH控制在7.5至8.5,保證氨基以未質(zhì)子化狀態(tài)存在,促進(jìn)親核攻擊。反應(yīng)溫和,時(shí)間適中,避免對(duì)蛋白質(zhì)和糖鏈結(jié)構(gòu)造成破壞。反應(yīng)完成后,通過透析或凝膠過濾去除游離染料及副產(chǎn)物,確保標(biāo)記產(chǎn)物的純度。
標(biāo)記后,Cy3的共軛染料帶來(lái)明顯的熒光特性,激發(fā)波長(zhǎng)約為550 nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為570 nm,使得黏蛋白在各種生物樣本中的定位和追蹤成為可能。
黏蛋白的高度糖基化和分子量大,使其在反應(yīng)過程中結(jié)構(gòu)穩(wěn)定且親水性強(qiáng),標(biāo)記過程通常不會(huì)影響其的構(gòu)象和功能。熒光標(biāo)記提升了其在細(xì)胞膜結(jié)合、分泌動(dòng)態(tài)和分子相互作用等方面的可視化研究潛力。
產(chǎn)品名稱:CY3-Mucin,CY3標(biāo)記黏蛋白
純度:95%+
性狀:固體或液體
儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:pg電子官方生物
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