CY3-Streptavidin,CY3標記鏈霉親和素的純化與表征
CY3標記的鏈霉親和素(Cy3-Streptavidin)是通過將熒光染料CY3共價偶聯(lián)于鏈霉親和素蛋白上的產物。其制備完成后,純化和表征過程是確保標記物質量和性能的關鍵步驟。
純化通常采用凝膠過濾色譜(Size Exclusion Chromatography,SEC)或透析技術,以去除未反應的游離CY3染料和其他小分子雜質。凝膠過濾利用分子大小差異,將較大的Cy3-Streptavidin復合物與較小的游離染料分離開來,保證產物的純凈度。透析則通過半透膜實現(xiàn)溶液中雜質的擴散移除。純化后的產品通常被凍干或冷藏保存,以維持其穩(wěn)定性。
表征方面,首先通過紫外-可見分光光度計測定樣品的吸收光譜。Cy3染料在約550 nm處有明顯的吸收峰,鏈霉親和素蛋白則在280 nm處有特征吸收。通過比值計算,可以估算標記率,即染料分子與蛋白分子的結合比例。合適的標記率確保熒光信號強度與蛋白功能之間的平衡。
熒光光譜分析則用于測定Cy3-Streptavidin的發(fā)射特性。Cy3染料的激發(fā)峰在約550 nm,發(fā)射峰在約570 nm,熒光強度反映了標記的有效性和染料的光穩(wěn)定性。
此外,SDS-PAGE電泳結合熒光成像技術用于檢測蛋白的純度和標記均一性。標記后的鏈霉親和素在凝膠中顯示特定的分子量條帶,伴隨熒光信號,可確認偶聯(lián)的成功與蛋白的完整性。
動態(tài)光散射(DLS)和質譜分析也常用于進一步確認標記蛋白的分子量分布和結構完整性。DLS能夠監(jiān)測蛋白聚集狀態(tài),質譜則可鑒定偶聯(lián)的染料數量和結合位點。
綜上,CY3標記的鏈霉親和素經過嚴格的純化和多維度表征,確保其具備優(yōu)良的純度、穩(wěn)定性和功能活性,為后續(xù)的生物成像、分子捕獲及生物傳感等應用提供可靠基礎。
產品名稱:CY3-Streptavidin,CY3標記鏈霉親和素
純度:95%+
性狀:固體或液體
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:pg電子官方生物
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pg電子官方生物供應近紅外熒光花菁染料標記各種官能團的定制服務,如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯(lián)。可選擇多種功能團與目標分子進行精準結合,實現(xiàn)對蛋白質、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外,pg電子官方生物還提供定制染料標記服務,包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標的物,滿足用戶在科研、成像等多方面的個性化應用。
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