產(chǎn)品名稱：CY5-Ponicidin，CY5-冬凌草乙素的合成方法

合成方法

1. 冬凌草乙素的化學(xué)修飾

酚羥基保護(hù)：

反應(yīng)：冬凌草乙素 + 三甲基硅烷（TMS-Cl） → TMS保護(hù)的冬凌草乙素（防止后續(xù)反應(yīng)中酚羥基干擾）。

條件：二氯甲烷（DCM）為溶劑，三乙胺（TEA）為堿，室溫反應(yīng)2小時(shí)，產(chǎn)率＞90%。

氨基引入（可選）：

反應(yīng)：TMS-Ponicidin + 對(duì)硝基苯基氯甲酸酯（PNC） → 活性酯中間體 → 與乙二胺反應(yīng) → 引入氨基。

條件：DMF為溶劑，40℃反應(yīng)12小時(shí)，產(chǎn)率約65%。

硫醇基團(tuán)引入（邁克爾加成前體）：

反應(yīng)：冬凌草乙素 + 巰基乙酸（TGA） → 硫醇修飾的冬凌草乙素（通過(guò)酯鍵或醚鍵連接）。

條件：DCC/DMAP催化，室溫反應(yīng)6小時(shí)，產(chǎn)率約70%。

2. CY5與冬凌草乙素的偶聯(lián)

羧酸-氨基偶聯(lián)（酰胺鍵）：

反應(yīng)：CY5-COOH + H?N-Ponicidin → CY5-CO-NH-Ponicidin（EDC/NHS活化）。

條件：pH 7.0-7.5，室溫反應(yīng)6小時(shí)，純化后產(chǎn)率約75-85%。

酚羥基偶聯(lián)（硫醚鍵）：

反應(yīng)：CY5-NCS + Ponicidin（酚羥基） → CY5-S-Ponicidin（無(wú)催化劑，DMSO中反應(yīng)）。

條件：室溫避光反應(yīng)24小時(shí)，產(chǎn)率約60-70%。

邁克爾加成（硫醚鍵）：

反應(yīng)：CY5-SH + Ponicidin（α,β-不飽和酮基） → CY5-S-Ponicidin（無(wú)催化劑，PBS緩沖液中反應(yīng)）。

條件：pH 7.4，37℃反應(yīng)12小時(shí)，產(chǎn)率約50-60%。

純化方法：

高效液相色譜（HPLC）：C18柱，流動(dòng)相為乙腈-水（含0.1% TFA），梯度洗脫，純度＞95%。

凝膠滲透色譜（GPC）：去除未反應(yīng)的CY5或冬凌草乙素，適用于大規(guī)模制備。

溫馨提示：僅用于科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)！wyh

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