CY3-R8，CY3標記多陽離子穿膜肽的反應步驟

R8是一種由八個精氨酸組成的多陽離子穿膜肽，用于分子運輸和細胞穿透研究。Cy3-R8則是通過共價標記Cy3染料于R8肽鏈上制備的熒光標記肽，常用于熒光成像和輸送系統(tǒng)構(gòu)建。

Cy3標記R8的詳細反應步驟如下：

原料準備

合成純化的R8肽，通常在5’或N端帶有氨基修飾，作為Cy3-NHS酯的反應位點。

Cy3染料以活性NHS酯形式準備，溶解于DMSO或其他適宜溶劑中。

溶液配置

將R8肽溶解于適宜的緩沖液中，如碳酸鹽緩沖液（pH 8.0-8.5），保證氨基的親核活性。

調(diào)節(jié)肽濃度一般在0.5-2 mg/mL范圍。

混合反應

以Cy3-NHS酯對R8肽的摩爾比一般設(shè)為1.2:1至2:1，確保標記效率。

緩慢將Cy3-NHS酯溶液加入肽溶液中，避免劇烈攪拌產(chǎn)生聚集。

反應條件控制

在室溫或4℃下避光反應1-3小時，避免Cy3染料光降解。

pH維持在8.0-8.5，促進酰胺鍵形成，同時保護肽鏈結(jié)構(gòu)。

反應終止

反應結(jié)束后，加入Tris緩沖液或其他含胺緩沖液，終止未反應的NHS酯，防止后續(xù)非特異反應。

純化步驟

通過透析、凝膠過濾色譜或高效液相色譜（HPLC）去除游離染料和反應副產(chǎn)物。

收集純化產(chǎn)物，凍干保存。

產(chǎn)物鑒定

通過紫外-可見光譜確認Cy3吸收峰，熒光光譜測定發(fā)射性能。

質(zhì)譜和SDS-PAGE分析確認標記的分子量及純度。

儲存與使用

標記產(chǎn)物避光冷藏（4℃或-20℃）保存，防止熒光淬滅。

使用時溶解于緩沖液，保持pH中性或弱堿。

產(chǎn)品名稱：CY3-R8

純度：95%+

性狀：固體或液體

儲藏條件：-20°C干燥避光保存

包裝規(guī)格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

廠家：pg電子官方生物

關(guān)于我們

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