CY3-Glutamine,CY3谷氨酰胺的反應(yīng)條件
CY3-Glutamine 是通過將花菁染料 Cyanine 3(CY3)共價連接于谷氨酰胺分子形成的熒光標(biāo)記衍生物。谷氨酰胺作為重要的氨基酸參與細(xì)胞代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和氮源傳遞,其標(biāo)記物有助于研究代謝通路及氨基酸運輸。
反應(yīng)條件概要:
反應(yīng)原理
通常利用CY3的活性酯形式(如CY3-NHS酯)與谷氨酰胺分子中自由的氨基進行酰胺鍵形成反應(yīng)。谷氨酰胺分子上的α-氨基是主要反應(yīng)位點,反應(yīng)生成穩(wěn)定的共價偶聯(lián)產(chǎn)物。
反應(yīng)體系
采用pH 7.5–8.5的緩沖體系(如碳酸鹽緩沖液或磷酸鹽緩沖液),保證氨基的非質(zhì)子化狀態(tài),提高與CY3-NHS酯的反應(yīng)效率。
溶劑選擇
反應(yīng)多在含水溶液中進行,少量DMSO或DMF可用于溶解CY3-NHS酯,防止水解。整體體系應(yīng)保持溫和,避免染料分解或氨基酸降解。
反應(yīng)溫度與時間
反應(yīng)溫度控制在室溫(20–25℃),反應(yīng)時間一般為2–4小時,保證充分偶聯(lián)同時避免副反應(yīng)。
摩爾比控制
CY3-NHS酯與谷氨酰胺的摩爾比通常為1:1至2:1,適度過量的染料有助于提高標(biāo)記效率,但過量需后續(xù)純化去除。
純化步驟
反應(yīng)結(jié)束后,采用透析、凝膠過濾或高效液相色譜(HPLC)除去未反應(yīng)游離染料及副產(chǎn)物,獲得純凈的CY3-Glutamine。
保護措施
反應(yīng)過程中應(yīng)避光操作,防止CY3光漂白。整個反應(yīng)體系保持無菌和無熱源環(huán)境,有利于產(chǎn)物穩(wěn)定。
通過以上反應(yīng)條件,獲得的CY3-Glutamine具有良好的熒光性質(zhì)和生物活性,適用于細(xì)胞代謝、氨基酸運輸及信號通路研究。
產(chǎn)品名稱:CY3-Glutamine,CY3谷氨酰胺
純度:95%+
性狀:固體或液體
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:pg電子官方生物
關(guān)于我們
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