CY3.5-Isomaltose,CY3.5標(biāo)記異麥芽糖的合成步驟
CY3.5標(biāo)記異麥芽糖(CY3.5-Isomaltose)是一種由兩個(gè)葡萄糖單元通過 α-(1→6) 糖苷鍵連接的二糖結(jié)構(gòu),通過共價(jià)引入紅色熒光染料Cy3.5后,可作為簡明糖類熒光探針用于生物識別。其合成步驟可分為如下幾個(gè)階段:
步:異麥芽糖的獲取
異麥芽糖可通過對淀粉或麥芽糖進(jìn)行酶解反應(yīng)獲得,使用轉(zhuǎn)葡萄糖苷酶(如Dextranse)可特異性產(chǎn)生α-1,6二糖。純化過程包括:
活性炭脫色;
凝膠過濾柱(如Sephadex G-10)分離;
HPLC或TLC檢測確認(rèn)純度。
第二步:糖分子修飾
糖類缺乏可反應(yīng)的氨基團(tuán),需進(jìn)行化學(xué)修飾。常采用還原胺化法,使用乙二胺或肼將糖分子還原端醛基轉(zhuǎn)化為胺基。例如,將異麥芽糖與乙二胺及NaBH?CN共溫育8小時(shí),引入伯胺結(jié)構(gòu)。
第三步:Cy3.5染料的引入
選用Cy3.5-NHS酯型染料,其對伯胺反應(yīng)具有良好的專一性。將其溶解在DMSO中后緩慢加入到含修飾糖的PBS緩沖液中,在避光、pH 8.0條件下反應(yīng)4~6小時(shí),形成穩(wěn)定的酰胺鍵連接。
第四步:產(chǎn)物純化
采用透析(MWCO 1000 Da)或C18固相萃取法去除未反應(yīng)的Cy3.5。終使用HPLC驗(yàn)證產(chǎn)物純度,檢測吸收峰(570 nm)與糖信號共同存在。
第五步:性質(zhì)確認(rèn)
通過UV-Vis譜圖(確認(rèn)Cy3.5標(biāo)記)與質(zhì)譜(確認(rèn)糖鏈質(zhì)量)分析判斷偶聯(lián)效果;并可通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀初步應(yīng)用驗(yàn)證。
產(chǎn)品名稱:CY3.5-Isomaltose,CY3.5標(biāo)記異麥芽糖
純度:95%+
性狀:固體或液體
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
pg電子官方生物供應(yīng)近紅外熒光花菁染料標(biāo)記各種官能團(tuán)的定制服務(wù),如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價(jià)偶聯(lián)。
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僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)AXC.2025.06.23