CY3.5-Isomaltotetraose，CY3.5標(biāo)記異麥芽四糖的合成路線

CY3.5標(biāo)記異麥芽四糖（CY3.5-Isomaltotetraose）是一種結(jié)構(gòu)由四個(gè) α-(1→6)連接的葡萄糖單元組成的低聚糖，通過化學(xué)方式引入熒光染料Cy3.5后，可作為示蹤探針用于生物體內(nèi)碳水代謝、菌群生態(tài)及轉(zhuǎn)運(yùn)研究。其合成路線可分為兩大部分：四糖主體的制備及Cy3.5染料的定向偶聯(lián)。

一、異麥芽四糖的合成

酶催化合成

使用α-葡萄糖苷轉(zhuǎn)移酶（GTF）對(duì)麥芽糖或異麥芽糖進(jìn)行酶促反應(yīng)，在適當(dāng)?shù)牡孜餄舛群头磻?yīng)時(shí)間條件下，可獲得不同長度的低聚糖。異麥芽四糖在反應(yīng)產(chǎn)物中濃度較高。

純化分離

產(chǎn)物經(jīng)過Sephadex G-15凝膠過濾或離子交換HPLC層析進(jìn)行分離，獲得純度大于95%的異麥芽四糖，可進(jìn)一步通過質(zhì)譜和NMR鑒定確認(rèn)結(jié)構(gòu)。

二、Cy3.5染料的偶聯(lián)合成路線

還原端胺基化處理

糖類偶聯(lián)一般需要在其還原端引入氨基團(tuán)。采用還原胺化法將還原端醛基與乙二胺縮合生成穩(wěn)定的胺端糖，為熒光偶聯(lián)提供功能基團(tuán)。

Cy3.5活化

Cy3.5染料一般以活性酯（如NHS酯）形式使用，適合與伯胺發(fā)生酰胺化反應(yīng)。

共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)

將氨基化的異麥芽四糖與Cy3.5-NHS酯在碳酸鹽緩沖液中反應(yīng)，避光條件下攪拌反應(yīng)4-8小時(shí)。反應(yīng)完成后通過透析或?qū)游鋈コ�游離染料。

純度分析與鑒定

終產(chǎn)物通過UPLC、UV-Vis吸收光譜（Cy3.5峰位約為570 nm）、質(zhì)譜分析等確認(rèn)結(jié)構(gòu)與標(biāo)記效率。

產(chǎn)品名稱：CY3.5-Isomaltotetraose

純度：95%+

規(guī)格：mg/g

用途：科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

推薦產(chǎn)品：

CY3-Quercetin CY3槲皮素

CY3-Rapamycin CY3標(biāo)記雷帕霉素

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僅用于科研，不能用于人體。小編axc