產(chǎn)品名稱：CY5-丹酚酸C，CY5-Salvianolic Acid C的合成方法

一、結(jié)構(gòu)組成與功能

丹酚酸C（Salvianolic Acid C）

特性：丹酚酸C是從丹參（Salvia miltiorrhiza）中提取的一種水溶性酚酸類化合物，分子式為 C??H??O??，含有多個酚羥基和羧基，具有強抗氧化能力。

功能：丹酚酸C可通過清除自由基、抑制炎癥反應(yīng)及調(diào)節(jié)細胞信號通路（如PI3K/Akt、NF-κB），發(fā)揮心血管保護、神經(jīng)保護及抗腫瘤作用。

CY5（Cyanine5）

特性：CY5是一種近紅外熒光染料，發(fā)射波長約為 650-670 nm，具有深層組織穿透能力（可達數(shù)厘米）和低自發(fā)熒光干擾特性，適用于體內(nèi)高靈敏度成像。

功能：提供熒光信號，實時追蹤丹酚酸C在體內(nèi)的分布、代謝及與靶組織的相互作用，適用于活體成像與動態(tài)監(jiān)測。

連接方式

化學鍵合：丹酚酸C的羧基（-COOH）或酚羥基（-OH）與CY5的氨基（-NH?）或活性酯基（如NHS酯）通過酰胺鍵或酯鍵連接，形成穩(wěn)定的共價結(jié)構(gòu)。

結(jié)構(gòu)優(yōu)化：連接位點需避免干擾丹酚酸C的生物活性（如與靶蛋白的結(jié)合能力），同時確保CY5的熒光性能不受影響。

二、合成方法

CY5-Salvianolic Acid C的合成通常通過以下步驟實現(xiàn)：

丹酚酸C的活化與修飾

羧基活化：在催化劑（如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺，EDC）和助催化劑（如N-羥基琥珀酰亞胺，NHS）存在下，丹酚酸C的羧基被激活為活性酯中間體。

反應(yīng)條件：通常在pH 4.5-6.5的緩沖液（如MES）中，室溫下反應(yīng)1-2小時，通過控制EDC/NHS與丹酚酸C的摩爾比（一般為1:1-5:1）優(yōu)化活化效率。

CY5的連接

反應(yīng)原理：活化后的丹酚酸C（含活性酯）與CY5的氨基發(fā)生親核取代反應(yīng)，生成穩(wěn)定的酰胺鍵連接產(chǎn)物。

反應(yīng)條件：在堿性條件（如pH 8.0-9.0的PBS）下，室溫下避光反應(yīng)2-4小時，通過控制CY5與丹酚酸C的摩爾比（一般為1:1-3:1）優(yōu)化連接效率。

純化：反應(yīng)結(jié)束后，通過反相高效液相色譜（RP-HPLC）或凝膠過濾色譜純化產(chǎn)物，去除未反應(yīng)的CY5、丹酚酸C及副產(chǎn)物，確保產(chǎn)物的純度（通常 >95%）。

結(jié)構(gòu)驗證

光譜確認：通過紫外-可見光譜（UV-Vis）和熒光光譜驗證CY5的成功連接及熒光性能。

質(zhì)譜（MS）：確認產(chǎn)物的分子量，確保丹酚酸C與CY5的正確連接。

生物活性驗證：通過體外實驗（如細胞抗氧化能力測定、炎癥因子抑制實驗）確認丹酚酸C的生物活性是否保留。

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