英文名 TFAX 488, SE
CAS號 222164-96-7
分子量 659.453
分子式 C25H15N3O13S2Li2
Alexa Fluor 488 NHS Ester(AF488 NHS Ester)是一種綠色熒光染料的活性酯形式,具有光穩(wěn)定性、熒光強度以及生物相容性。它通過NHS(N-hydroxysuccinimide)酯活性基團專一性地與蛋白質、肽、多糖、核酸等生物大分子中的伯胺(–NH?)反應,形成穩(wěn)定的酰胺鍵,從而實現(xiàn)高效、持久的熒光標記。
作為Alexa Fluor系列的一員,AF488 在生命科學領域中被廣泛應用于熒光顯微鏡、流式細胞術、免疫熒光、Western blot、原位雜交(FISH)、熒光示蹤、定量分析等多種熒光相關實驗。
主要應用
1. 蛋白質標記
AF488 NHS Ester 可用于標記抗體、酶、受體蛋白、轉運蛋白等含有伯胺結構的蛋白質,不影響其生物活性,適用于:
熒光免疫染色(IF)
熒光原位雜交(FISH)
Western blot 二抗標記
蛋白質追蹤與定位分析
2. 細胞與組織標記
AF488 標記的抗體或探針可用于活細胞或固定細胞的標記與顯微觀察,尤其適合多重染色成像,與紅色或遠紅染料(如AF594、AF647)配對使用,信號清晰、分辨率高。
3. 流式細胞術(FACS)
Alexa Fluor 488 發(fā)射波長與常見的 FITC 類似,但熒光強度與光穩(wěn)定性均優(yōu)于FITC,是流式抗體標記中的優(yōu)選熒光基團,適用于免疫表型分析、細胞周期檢測、凋亡分析等。
4. 核酸、寡核苷酸標記
通過AF488 NHS酯對含氨基修飾的寡核苷酸進行熒光標記,可制備特異性熒光探針,用于RNA探針、DNA雜交、基因表達分析等分子生物學應用。
5. 納米顆粒與生物材料表面修飾
AF488 NHS Ester 還常用于修飾具有表面伯胺的納米顆粒、聚合物微球、水凝膠、表面功能化玻片等,提升其可視化或追蹤功能。
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