小分子上標(biāo)記生物素標(biāo)簽定制技術(shù)

1. 簡(jiǎn)介

將生物素（Biotin）標(biāo)記于小分子藥物或探針上，可用于與鏈霉親和素（Streptavidin）體系配合，進(jìn)行拉下實(shí)驗(yàn)、成像、分子探針定位或靶向釋放。常采用“活性酯法”或“點(diǎn)擊化學(xué)”進(jìn)行偶聯(lián)。

2. 生物素結(jié)構(gòu)與衍生物選擇

活性酯類(lèi)：Biotin-NHS（生物素-N-羥基琥珀酰亞胺酯）；

疊氮/炔基類(lèi)：Biotin-N?，Biotin-Alkyne；

馬來(lái)酰亞胺類(lèi)：用于巰基反應(yīng)；

PEG間隔臂：Biotin-PEG-NHS 提高水溶性與空間靈活性。

3. 偶聯(lián)方式選擇

1. 伯胺反應(yīng)法（NHS酯）

   小分子含伯胺（–NH?）時(shí)，推薦Biotin-NHS；

   反應(yīng)pH 7.5~~8.5，室溫下反應(yīng)2~~6小時(shí)；

   HPLC或萃取法純化。

2. 點(diǎn)擊反應(yīng)（CuAAC）

   小分子含炔基，與Biotin-N?反應(yīng)；

   CuSO?/sodium ascorbate/TBTA催化；

   常溫下反應(yīng)數(shù)小時(shí)，純化方便，偶聯(lián)效率高。

3. 巰基反應(yīng)法

   小分子含巰基（–SH），選擇Biotin-MAL；

   pH 6.5\~7.0，反應(yīng)快速，高選擇性。

4. 定制細(xì)節(jié)控制

小分子結(jié)構(gòu)中反應(yīng)基團(tuán)的穩(wěn)定性（避免酸堿降解）；

使用PEG修飾可降低非特異結(jié)合；

產(chǎn)物應(yīng)經(jīng)MS或NMR驗(yàn)證結(jié)合位點(diǎn)與單一性；

應(yīng)保持生物素的生物活性（不能阻礙其與Streptavidin結(jié)合）。

5. 應(yīng)用方向

藥物-生物素探針用于靶向細(xì)胞表面蛋白拉下；

與熒光標(biāo)記鏈霉親和素協(xié)同成像；

生物素-藥物結(jié)合物用于放大靶向遞藥系統(tǒng)；

微陣列、生物芯片固定探針系統(tǒng)。 

規(guī)格：mg與g級(jí)別

產(chǎn)地：西安pg電子官方生物

用途：科研

以上資料由pg電子官方生物小編zhn提供，僅用于科研

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