FITC-ADP，F(xiàn)ITC-二磷酸腺苷，ADP-FITC異硫氰酸熒光素的合成步驟

FITC-ADP（Fluorescein isothiocyanate–adenosine diphosphate）是一種將異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記至腺苷二磷酸（ADP）上的熒光核苷酸衍生物，常用于研究核苷酸受體、酶活性和細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物過程。該合成通常依賴于FITC與ADP分子中可反應(yīng)的胺基之間形成穩(wěn)定的硫脲鍵。

合成步驟如下：

原料準(zhǔn)備：使用高純度的ADP二鈉鹽和FITC（常用5-或6-異構(gòu)體），反應(yīng)在無水環(huán)境中進(jìn)行以避免核苷酸降解。ADP在結(jié)構(gòu)上具有一個(gè)初級胺基來自腺嘌呤的6-氨基位點(diǎn)，可作為與FITC反應(yīng)的位點(diǎn)。

緩沖液溶解：將ADP溶解于碳酸氫鈉緩沖液（pH 8.5），這一堿性環(huán)境有助于提高胺基的親核性。FITC溶于少量無水DMSO或DMF，以確保其活性。

偶聯(lián)反應(yīng)：將FITC溶液逐滴加入ADP溶液中，在避光條件下于室溫或4°C輕微攪拌反應(yīng)數(shù)小時(shí)至過夜。反應(yīng)期間，F(xiàn)ITC的異硫氰酸基團(tuán)與ADP的胺基反應(yīng)，形成穩(wěn)定的硫脲鍵，構(gòu)建熒光標(biāo)記的核苷酸。

純化：反應(yīng)完成后，使用反相高效液相色譜（HPLC）進(jìn)行分離，洗脫并收集FITC-ADP產(chǎn)物。其他方法如透析、凝膠過濾層析也可用于除去游離FITC與未反應(yīng)ADP。

驗(yàn)證：通過紫外-可見吸收光譜（UV-Vis）和熒光光譜確認(rèn)產(chǎn)物具有典型的FITC吸收（約495 nm）和發(fā)射波長（約520 nm）。同時(shí)可采用質(zhì)譜（如ESI-MS）驗(yàn)證分子量，進(jìn)一步確認(rèn)結(jié)合位點(diǎn)。

終產(chǎn)物FITC-ADP是一種親水性、熒光性核苷酸衍生物，適合用于體外和細(xì)胞環(huán)境中的生物分子標(biāo)記和探針構(gòu)建。

產(chǎn)品名稱：FITC-ADP，F(xiàn)ITC-二磷酸腺苷

純度：95%+

性狀：基于不同的分子量，呈白色 / 類白色固體，或液體。

溶劑：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機(jī)溶劑。

儲(chǔ)藏條件：-20°C干燥避光保存

包裝規(guī)格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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