英文名稱：Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AFC
中文名稱：乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-纈氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-三氟甲基香豆素

乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-纈氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-三氟甲基香豆素（Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AFC，簡(jiǎn)稱Ac-DEVD-AFC）是一種熒光標(biāo)記的四肽底物，專用于檢測(cè)半胱天冬酶-3（Caspase-3）及Caspase-7的酶活性。其結(jié)構(gòu)中，N端乙�；�（Ac）防止肽鏈降解，天冬氨酸-谷氨酸-纈氨酸-天冬氨酸（DEVD）序列為Caspase-3/7的特異性切割位點(diǎn)，C端7-氨基-4-三氟甲基香豆素（AFC）作為熒光基團(tuán)，在未被切割時(shí)因共軛結(jié)構(gòu)熒光較弱，酶切后釋放游離AFC，其熒光強(qiáng)度（激發(fā)波長(zhǎng)400 nm，發(fā)射波長(zhǎng)505 nm）顯著增強(qiáng)，可通過熒光分光光度計(jì)或微孔板閱讀器定量檢測(cè)。

Caspase-3/7是細(xì)胞凋亡執(zhí)行階段的核心蛋白酶，其活性變化可反映凋亡信號(hào)通路的激活狀態(tài)。Ac-DEVD-AFC通過提供高靈敏度的熒光檢測(cè)手段，成為研究細(xì)胞凋亡機(jī)制的重要工具。例如，在神經(jīng)退行性疾病模型中，可通過測(cè)量腦組織勻漿中Caspase-3/7對(duì)Ac-DEVD-AFC的切割活性，評(píng)估神經(jīng)元凋亡程度；在藥物毒性評(píng)價(jià)中，該底物可用于檢測(cè)化合物是否通過誘導(dǎo)凋亡導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

Ac-DEVD-AFC的使用需優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件以提高準(zhǔn)確性。例如，反應(yīng)緩沖液需包含適當(dāng)濃度的DTT以維持酶活性，同時(shí)避免過高濃度干擾熒光檢測(cè)；反應(yīng)溫度（通常37℃）及時(shí)間需根據(jù)樣本類型調(diào)整，以確保熒光信號(hào)與酶活性呈線性關(guān)系。此外，需通過添加特異性抑制劑（如Ac-DEVD-CHO）驗(yàn)證信號(hào)特異性，排除其他蛋白酶的干擾。目前，Ac-DEVD-AFC已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、藥理學(xué)及病理學(xué)研究，為理解凋亡相關(guān)疾病的分子機(jī)制提供了關(guān)鍵技術(shù)支撐。

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