【產(chǎn)品名稱】:CY5.5-Fructose/Fru,CY5.5標(biāo)記的果糖
【基本介紹】:
CY5.5標(biāo)記的果糖,CY5.5-Fructose/Fru
將熒光染料CY5.5標(biāo)記至單糖分子如果糖(Fructose)上,是實(shí)現(xiàn)糖類分子追蹤與靶向識(shí)別的一種常見策略。判斷CY5.5是否已完全標(biāo)記所有目標(biāo)糖分子,對(duì)于確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、熒光強(qiáng)度一致性及標(biāo)記物的定量應(yīng)用尤為關(guān)鍵。以下是幾種有效的判斷與驗(yàn)證方法:
1. 紫外-可見吸收光譜(UV-Vis)分析
CY5.5在675 nm左右具有特征吸收峰。將標(biāo)記后產(chǎn)物與純果糖對(duì)照,測(cè)量其吸收光譜。
若溶液中除標(biāo)記果糖外仍有未標(biāo)記的游離果糖,則該體系整體的摩爾吸光系數(shù)會(huì)降低。
比較樣品的A280與A675比值,也可用于初步估算標(biāo)記效率。
2. 熒光定量分析
使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法,通過測(cè)定樣品的熒光強(qiáng)度(Exc: ~675 nm, Em: ~695 nm),反推出CY5.5分子的摩爾濃度;
同時(shí)測(cè)定總糖濃度(如用苯酚-硫酸法);
若兩者摩爾濃度比例接近1:1,說明基本實(shí)現(xiàn)完全標(biāo)記。
3. HPLC或UPLC分析(配備熒光檢測(cè)器)
分離標(biāo)記與未標(biāo)記的果糖分子,并通過檢測(cè)峰面積進(jìn)行定量;
使用熒光檢測(cè)器特異識(shí)別CY5.5信號(hào),可準(zhǔn)確分辨游離果糖是否仍存在;
更進(jìn)一步,可用質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行確認(rèn)。
4. 薄層色譜(TLC)/電泳
在薄層板上展開反應(yīng)前后樣品;
使用CY5.5熒光信號(hào)檢測(cè)是否存在多個(gè)斑點(diǎn);
如果出現(xiàn)多個(gè)斑點(diǎn),則表明標(biāo)記不完全或有副產(chǎn)物。
5. 核磁共振(NMR)分析
觀察果糖的關(guān)鍵化學(xué)位點(diǎn)是否發(fā)生位移或信號(hào)消失(尤其是C1, C2的質(zhì)子信號(hào));
可判斷CY5.5是否通過氨基、羧基或酯鍵成功共價(jià)連接。
結(jié)論:
標(biāo)記效率的確認(rèn)不僅是實(shí)驗(yàn)重復(fù)性和數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的保障,也關(guān)系到后續(xù)生物成像、分子識(shí)別等應(yīng)用中的信號(hào)強(qiáng)度穩(wěn)定性。建議采用兩種以上方法交叉驗(yàn)證,如UV-Vis聯(lián)合HPLC定量,可更準(zhǔn)確判斷是否所有果糖分子已被CY5.5標(biāo)記。我們提供這個(gè)產(chǎn)品,僅供科研,如有需要,歡迎咨詢!
【基本信息】:
生產(chǎn)地:陜西·西安
純度標(biāo)準(zhǔn):≥95%(高純級(jí))
物理形態(tài):粉末狀固體
包裝規(guī)格:50mg / 100mg / 250mg / 500mg(靈活選量)
貯存要求:低溫避光存儲(chǔ)
特別聲明:本品為科研專用!禁止臨床或人體應(yīng)用!
【關(guān)于我們】:
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