FITC異硫氰酸熒光素

FITC（異硫氰酸熒光素）——經(jīng)典綠色熒光標記試劑用于氨基修飾生物分子

一、產(chǎn)品簡介

FITC（Fluorescein Isothiocyanate）是一種廣泛使用的綠色熒光染料，分子式C21H11NO5S，分子量389.4。其結(jié)構(gòu)中含有異硫氰酸酯（–N=C=S）活性基團，能夠與蛋白質(zhì)、肽鏈以及多種含有氨基的分子形成穩(wěn)定的共價鍵，因而廣泛用于生物標記和免疫檢測領(lǐng)域。

FITC具有較高的熒光量子產(chǎn)率和良好的光穩(wěn)定性，激發(fā)波長約495 nm，發(fā)射波長約520 nm，呈鮮明的綠色熒光，是免疫熒光染色、細胞追蹤、分子成像等科研領(lǐng)域的經(jīng)典工具。

二、化學(xué)性質(zhì)與結(jié)構(gòu)

化學(xué)結(jié)構(gòu)

FITC包含熒光素基團和異硫氰酸酯活性基團。異硫氰酸酯基團能與蛋白質(zhì)或其他生物分子上的游離氨基（如賴氨酸側(cè)鏈）共價結(jié)合。

分子量389.4 Da

分子式C21H11NO5S

溶解性

FITC易溶于有機溶劑如DMSO、DMF，微溶于水，通常需先溶于有機溶劑后稀釋于水或緩沖液中。

穩(wěn)定性

對光敏感，強光下易發(fā)生光漂白，建議避光保存和使用。

三、熒光性質(zhì)

性質(zhì) 參數(shù)

激發(fā)波長 495 nm

發(fā)射波長 520 nm

熒光顏色 綠色

熒光量子產(chǎn)率 約0.9

光穩(wěn)定性 良好，需避免強光直射

FITC的熒光信號明亮，適合多種熒光顯微鏡、流式細胞儀和熒光板檢測設(shè)備使用。

四、標記原理與應(yīng)用

標記原理

FITC的異硫氰酸酯基團能與含有游離氨基的分子（蛋白質(zhì)、肽、多肽、胺類化合物）發(fā)生親核加成反應(yīng)，形成穩(wěn)定的硫代脲共價鍵。該反應(yīng)通常在堿性緩沖液（pH 8.0-9.0）中進行，以促進氨基的活性。

標記流程簡述

溶解FITC于適宜有機溶劑；

將待標記的蛋白或分子溶解于堿性緩沖液中；

緩慢加入FITC溶液，溫和攪拌反應(yīng)一定時間（通常1-4小時）；

通過透析、凝膠過濾或?qū)游龇ㄈコ�游離FITC，獲得純凈標記產(chǎn)物。

應(yīng)用范圍

免疫熒光染色：標記體，實現(xiàn)特異性檢測細胞或組織中的目標原；

細胞追蹤：標記細胞或細胞組分，觀察細胞動態(tài)、遷移和定位；

分子相互作用研究：標記蛋白質(zhì)或核酸，分析結(jié)合動力學(xué)；

熒光成像：活細胞成像、組織切片觀察、體內(nèi)成像等。

五、產(chǎn)品特點

1. 高效穩(wěn)定的熒光性能

FITC具有高熒光量子效率和明亮的綠色熒光，適合多種熒光檢測儀器。

2. 反應(yīng)特異性強

異硫氰酸酯基團對游離氨基選擇性高，標記效率高，結(jié)合穩(wěn)定。

3. 兼容多種生物分子

廣泛適用于蛋白質(zhì)、多肽、氨基修飾的多糖等生物大分子標記。

4. 易于操作

標記條件溫和，無需復(fù)雜催化劑，適合常規(guī)實驗室操作。

六、使用方法與注意事項

1. 溶解與儲存

溶于DMSO或DMF制備高濃度儲備液，避免水中長期存放以防水解；

儲存于-20℃避光密封，防止光降解。

2. 標記反應(yīng)

反應(yīng)緩沖常用碳酸鹽緩沖液（pH 8.5-9.0）；

控制FITC與待標記物摩爾比，避免過量導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性；

反應(yīng)時間1-4小時，室溫或4℃進行。

3. 純化與檢測

反應(yīng)后需通過透析或柱層析去除未結(jié)合FITC；

標記產(chǎn)物可通過紫外-可見光譜、熒光光譜及SDS-PAGE（結(jié)合熒光掃描）檢測。

4. 注意事項

避光操作，避免熒光淬滅；

反應(yīng)pH過高或FITC過量可能影響生物活性；

FITC在水溶液中穩(wěn)定性有限，建議新鮮配制使用。

七、安全性與環(huán)保

FITC有一定的光敏性和毒性，操作時應(yīng)避免吸入粉塵和皮膚接觸；

使用時佩戴手套、護目鏡，操作環(huán)境通風(fēng)良好；

廢棄物按化學(xué)品管理規(guī)范處理。

八、質(zhì)量控制標準

檢測項目 標準指標

外觀 黃色至橙黃色結(jié)晶性粉末

純度 ≥95%

熒光特性 激發(fā)495 nm，發(fā)射520 nm

水分含量 ≤1%

熔點 240-244 ℃

九、包裝規(guī)格與儲存

規(guī)格 包裝形式 儲存條件

5 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

25 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

100 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

十、常見問題解答

Q1：FITC標記是否會影響蛋白質(zhì)活性？

A：過量標記可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)構(gòu)象改變和活性降低，建議優(yōu)化FITC與蛋白比例。

Q2：如何延長FITC標記物的熒光穩(wěn)定性？

A：避光保存，使用淬滅劑，盡量避免高溫和強光暴露。

Q3：FITC適合標記哪些分子？

A：主要標記含有游離氨基的蛋白質(zhì)、多肽及氨基化修飾的多糖。

十一、總結(jié)

FITC（異硫氰酸熒光素）因其優(yōu)異的熒光性能和化學(xué)反應(yīng)活性，成為生命科學(xué)領(lǐng)域中經(jīng)典、廣泛應(yīng)用的熒光標記試劑。無論是免疫熒光檢測、細胞追蹤還是分子相互作用研究，F(xiàn)ITC均能提供穩(wěn)定且高靈敏度的熒光信號，幫助科研人員獲得精準的實驗數(shù)據(jù)和豐富的生物學(xué)信息。

西安pg電子官方生物專業(yè)提供各類熒光標記產(chǎn)品及定制服務(wù)，覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料，滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領(lǐng)域的需求。

西安pg電子官方生物確保標記分子高效、穩(wěn)定且保留生物活性。我們支持個性化定制，靈活設(shè)計標記方案，快速響應(yīng)客戶需求。

廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司

用途:科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實驗!

相關(guān)產(chǎn)品：

glucan-PEI25K-FITC

glucan-席夫堿-PEI25K-FITC

mPEG-FITC MW：10K

Poly-L-lysine–FITC MW:150,000-300,000

Hyaluronate-Fluorescein,HA-FITC 綠色熒光標記透明質(zhì)酸（30-50k）

定制FITC-HA（2000k）

FITC-透明質(zhì)酸鈉

FITC-乳糖