FITC-Transferrin
FITC-Transferrin(熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)鐵蛋白)——細(xì)胞內(nèi)吞與靶向傳輸示蹤探針
一、產(chǎn)品簡介
FITC-Transferrin是一種將轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin,Tf)通過熒光素異硫氰酸酯(FITC)共價(jià)標(biāo)記制備而成的生物標(biāo)記試劑。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種鐵離子結(jié)合蛋白,主要負(fù)責(zé)將鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi),參與細(xì)胞的鐵代謝和生理調(diào)控。通過FITC標(biāo)記后,轉(zhuǎn)鐵蛋白獲得綠色熒光信號(hào),能夠被廣泛用于細(xì)胞攝取研究、受體介導(dǎo)內(nèi)吞、細(xì)胞表面受體定位和靶向藥物遞送等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究。
二、轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)基礎(chǔ)知識(shí)
結(jié)構(gòu)與功能:轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種約80 kDa的糖蛋白,具有兩個(gè)鐵結(jié)合位點(diǎn),可與Fe??高親和力結(jié)合。轉(zhuǎn)鐵蛋白通過與細(xì)胞表面轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)結(jié)合,介導(dǎo)鐵的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)。
生物學(xué)意義:
參與鐵穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié),保證細(xì)胞對(duì)鐵的需求;
由于腫瘤細(xì)胞和快速增殖細(xì)胞通常高表達(dá)TfR,轉(zhuǎn)鐵蛋白成為靶向遞送的理想載體;
在藥物輸送、細(xì)胞標(biāo)記及診斷成像中有廣泛應(yīng)用。
三、FITC標(biāo)記原理及制備
標(biāo)記機(jī)理:FITC含有活性的異硫氰酸酯基團(tuán)(–N=C=S),能與轉(zhuǎn)鐵蛋白中的賴氨酸殘基氨基(–NH?)形成穩(wěn)定的共價(jià)硫脲鍵。
制備過程:
將轉(zhuǎn)鐵蛋白溶解在適宜pH緩沖液中(通常pH 8.0-9.0);
在緩沖液中緩慢加入FITC,反應(yīng)一定時(shí)間以實(shí)現(xiàn)有效標(biāo)記;
通過透析或凝膠過濾除去未結(jié)合的游離FITC,純化得到FITC-Transferrin;
標(biāo)記效率:控制在保證蛋白活性的前提下,獲得適合實(shí)驗(yàn)要求的熒光強(qiáng)度。
四、產(chǎn)品理化性質(zhì)
性質(zhì) 說明
分子量 約80 kDa
外觀 綠色透明液體或凍干粉
熒光激發(fā)/發(fā)射波長 激發(fā)約495 nm,發(fā)射約520 nm(綠色熒光)
溶解性 易溶于PBS、生理鹽水及常規(guī)緩沖液
穩(wěn)定性 避光保存于4°C,熒光穩(wěn)定性良好
生物活性 保持對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的高親和力
五、產(chǎn)品性能與特點(diǎn)
1. 保持高親和力受體結(jié)合特性
FITC標(biāo)記過程中保證轉(zhuǎn)鐵蛋白三維結(jié)構(gòu)及活性,標(biāo)記后仍能有效與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體結(jié)合,模擬自然受體介導(dǎo)的內(nèi)吞過程。
2. 明亮、穩(wěn)定的綠色熒光信號(hào)
FITC分子發(fā)射出明亮綠色熒光,便于使用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等多種檢測設(shè)備實(shí)現(xiàn)高靈敏度檢測。
3. 優(yōu)異的生物相容性與低細(xì)胞毒性
適用于活細(xì)胞實(shí)驗(yàn),且對(duì)細(xì)胞無明顯毒副作用,適合多種細(xì)胞系和體外應(yīng)用。
4. 多領(lǐng)域應(yīng)用廣泛
涵蓋細(xì)胞生物學(xué)、藥物遞送、納米載體靶向、受體表達(dá)分析及生物醫(yī)學(xué)成像等。
六、主要應(yīng)用
1. 細(xì)胞攝取及受體介導(dǎo)內(nèi)吞研究
研究細(xì)胞攝取轉(zhuǎn)鐵蛋白的機(jī)制及動(dòng)力學(xué);
探索不同細(xì)胞類型中轉(zhuǎn)鐵蛋白受體表達(dá)水平及功能。
2. 受體靶向藥物及納米載體研究
作為靶向分子修飾納米粒子表面,實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞中的高效遞送;
監(jiān)測藥物載體的細(xì)胞攝取和分布。
3. 細(xì)胞標(biāo)記及流式細(xì)胞分析
用于分析細(xì)胞表面轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的表達(dá)和分布;
結(jié)合多重染色實(shí)現(xiàn)細(xì)胞表型鑒定和功能分析。
4. 熒光顯微成像
觀察轉(zhuǎn)鐵蛋白及其受體在細(xì)胞及組織中的定位;
輔助疾病機(jī)制的研究,如腫瘤、神經(jīng)退行性疾病和鐵代謝異常。
七、使用方法與操作建議
1. 配制和保存
凍干粉或液體形式產(chǎn)品在使用前用PBS或相應(yīng)緩沖液復(fù)溶;
建議濃度為0.1-1 mg/mL,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整;
避光保存,4°C冷藏,避免反復(fù)凍融。
2. 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化
推薦使用濃度范圍0.1-20 μg/mL,孵育時(shí)間30分鐘至1小時(shí);
室溫或4°C孵育均可,視實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)靈活調(diào)整;
孵育后多次用緩沖液洗滌,減少非特異性結(jié)合。
3. 注意事項(xiàng)
避免熒光淬滅,實(shí)驗(yàn)及存儲(chǔ)中應(yīng)避免強(qiáng)光照射;
標(biāo)記可能對(duì)蛋白部分活性產(chǎn)生影響,建議實(shí)驗(yàn)前驗(yàn)證結(jié)合能力;
流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)中設(shè)置陰性對(duì)照,保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。
八、質(zhì)量控制
項(xiàng)目 標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)
純度 ≥95%
熒光強(qiáng)度 激發(fā)495 nm,發(fā)射520 nm,信號(hào)穩(wěn)定
受體結(jié)合活性 ≥90%保持天然轉(zhuǎn)鐵蛋白受體結(jié)合能力
分子完整性 SDS-PAGE檢測,確認(rèn)無降解
細(xì)胞相容性 細(xì)胞存活率≥90%
九、包裝規(guī)格
規(guī)格 包裝形式 儲(chǔ)存條件
0.5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
1 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
十、常見問題
Q1:FITC-Transferrin的激發(fā)和發(fā)射波長是多少?
A:激發(fā)波長約495 nm,發(fā)射波長約520 nm,呈明亮綠色熒光。
Q2:該產(chǎn)品適合用于活細(xì)胞染色嗎?
A:是的,F(xiàn)ITC-Transferrin適合活細(xì)胞攝取及受體研究,建議先測試細(xì)胞毒性。
Q3:如何防止熒光信號(hào)衰減?
A:避免強(qiáng)光照射,使用漂白劑,實(shí)驗(yàn)及存儲(chǔ)時(shí)避光處理。
十一、總結(jié)
FITC-Transferrin結(jié)合了轉(zhuǎn)鐵蛋白天然的生物功能和FITC優(yōu)異的熒光性能,是細(xì)胞生物學(xué)及藥物輸送領(lǐng)域的重要工具。其保持了轉(zhuǎn)鐵蛋白的高親和力和受體結(jié)合活性,能夠有效用于細(xì)胞攝取、受體定位及藥物靶向研究,助力生命科學(xué)研究和精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)發(fā)展。
西安pg電子官方生物專業(yè)提供各類熒光標(biāo)記產(chǎn)品及定制服務(wù),覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機(jī)制研究等領(lǐng)域的需求。
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廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
產(chǎn)地:西安
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!
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