FITC-LCA 綠色熒光標(biāo)記小扁豆凝集素

FITC標(biāo)記小扁豆凝集素（LCA）——綠色熒光糖鏈識別探針

一、產(chǎn)品簡介

FITC-LCA是將小扁豆凝集素（Lens culinaris agglutinin，LCA）通過共價(jià)結(jié)合方式標(biāo)記上綠色熒光染料熒光素異硫氰酸酯（FITC）制備的熒光標(biāo)記糖結(jié)合蛋白。LCA是一種來源于小扁豆的植物凝集素，具有對特定糖鏈結(jié)構(gòu)尤其是富含巖藻糖和高甘露糖結(jié)構(gòu)的高親和力，廣泛應(yīng)用于糖蛋白的鑒定、細(xì)胞表面糖鏈研究及疾病相關(guān)糖修飾分析。通過FITC標(biāo)記，LCA獲得了強(qiáng)烈且穩(wěn)定的綠色熒光信號，適合用于熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)及其他熒光檢測技術(shù)。

二、小扁豆凝集素（LCA）簡介

來源：提取自小扁豆（Lens culinaris）種子；

分子結(jié)構(gòu)：LCA為四聚體蛋白，分子量約26–28 kDa（單體）；

糖結(jié)合特異性：優(yōu)先識別含巖藻糖（Fucose）和高甘露糖的寡糖結(jié)構(gòu)，特別是N-連接糖鏈中的核心巖藻糖；

生物功能：

介導(dǎo)細(xì)胞間識別和結(jié)合；

用于糖蛋白的特異性檢測；

在腫瘤細(xì)胞糖鏈變異研究中具有重要應(yīng)用。

三、FITC標(biāo)記原理與方法

FITC分子含有活性的異硫氰酸酯基團(tuán)（–N=C=S），能與LCA蛋白的賴氨酸側(cè)鏈氨基（–NH?）共價(jià)結(jié)合，形成穩(wěn)定的硫脲鍵；

標(biāo)記過程溫和，避免蛋白質(zhì)構(gòu)象破壞，大限度保持LCA糖結(jié)合活性；

通過純化去除未結(jié)合的FITC，得到高純度的FITC-LCA產(chǎn)品。

四、產(chǎn)品理化性質(zhì)

性質(zhì) 說明

外觀 綠色熒光凍干粉或透明綠色液體

分子量 單體約26-28 kDa，四聚體約104-112 kDa

熒光特性 激發(fā)波長約495 nm，發(fā)射波長約520 nm（綠色熒光）

溶解性 良好溶于PBS、生理鹽水及緩沖液

穩(wěn)定性 避光、低溫保存下熒光信號穩(wěn)定

標(biāo)記率（FITC/LCA） 通常為1-4 FITC分子/每個(gè)LCA四聚體

五、產(chǎn)品性能與特點(diǎn)

1. 高親和性和特異性結(jié)合

FITC-LCA保持了LCA對含巖藻糖及甘露糖的高親和性，能夠準(zhǔn)確識別糖蛋白及細(xì)胞表面相關(guān)糖基結(jié)構(gòu)。

2. 強(qiáng)烈且穩(wěn)定的綠色熒光

FITC的綠色熒光信號明亮且漂白性好，方便通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)等進(jìn)行高靈敏度檢測。

3. 保持蛋白功能活性

標(biāo)記條件溫和，大程度保護(hù)LCA蛋白的三維結(jié)構(gòu)及糖結(jié)合功能，確保實(shí)驗(yàn)可靠性。

4. 廣泛的適用性

可用于細(xì)胞糖蛋白定位、組織切片染色、流式細(xì)胞術(shù)分析及糖鏈修飾研究，滿足多樣化實(shí)驗(yàn)需求。

六、主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. 細(xì)胞表面糖蛋白分析

利用FITC-LCA標(biāo)記細(xì)胞表面的巖藻糖和高甘露糖糖基，分析細(xì)胞糖鏈表達(dá)狀態(tài)；

適用于腫瘤細(xì)胞及免疫細(xì)胞表型的糖基化研究。

2. 組織免疫熒光染色

在組織切片中定位含特定糖鏈的糖蛋白，研究組織病理學(xué)變化；

與其他體或熒光探針配合，實(shí)現(xiàn)多重標(biāo)記。

3. 流式細(xì)胞術(shù)分析

對細(xì)胞群體進(jìn)行定量檢測，分析細(xì)胞表面糖結(jié)構(gòu)表達(dá)的異質(zhì)性；

用于檢測細(xì)胞分化狀態(tài)和疾病相關(guān)糖修飾變化。

4. 糖蛋白純化與鑒定

結(jié)合LCA的糖結(jié)合特性，輔助篩選和純化含有特定糖基的糖蛋白。

5. 腫瘤及免疫研究

研究腫瘤細(xì)胞糖基化異常，揭示腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制；

探討免疫細(xì)胞表面糖結(jié)構(gòu)對免疫功能的影響。

七、使用方法與建議

1. 配制與保存

凍干粉用PBS或適當(dāng)緩沖液復(fù)溶，濃度一般為0.1–1 mg/mL，使用前充分混勻；

避光保存，4°C冷藏短期保存，凍干狀態(tài)可長期–20°C保存。

2. 實(shí)驗(yàn)操作

標(biāo)準(zhǔn)染色濃度需根據(jù)細(xì)胞類型及實(shí)驗(yàn)需求優(yōu)化，常用濃度范圍為1–20 μg/mL；

染色時(shí)間一般為30分鐘至1小時(shí)，室溫或4°C孵育均可；

染色后需用緩沖液充分洗滌，減少非特異性結(jié)合。

3. 注意事項(xiàng)

避免強(qiáng)光照射，減少熒光淬滅；

標(biāo)記可能對結(jié)合活性有輕微影響，建議對比未標(biāo)記LCA進(jìn)行活性驗(yàn)證；

用于流式細(xì)胞術(shù)時(shí)，建議結(jié)合適當(dāng)?shù)年幮詫φ铡?/p>

八、質(zhì)量控制指標(biāo)

檢測項(xiàng)目 標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)

外觀 綠色凍干粉或透明液體

純度 ≥95%

熒光性能 激發(fā)495 nm，發(fā)射520 nm，熒光強(qiáng)烈穩(wěn)定

糖結(jié)合活性 保持≥90%原LCA糖結(jié)合能力

分子量 SDS-PAGE確認(rèn)四聚體結(jié)構(gòu)完整

溶解性 良好，無明顯沉淀

九、包裝規(guī)格

規(guī)格 包裝形式 儲(chǔ)存條件

0.5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

1 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

十、常見問題解答

Q1：FITC-LCA的激發(fā)和發(fā)射波長是多少？

A：激發(fā)波長約495 nm，發(fā)射波長約520 nm，呈明亮綠色熒光。

Q2：能否用于活細(xì)胞染色？

A：FITC-LCA可以用于活細(xì)胞表面糖蛋白的標(biāo)記，但需要注意濃度和孵育時(shí)間，避免影響細(xì)胞活力。

Q3：染色后如何避免熒光淬滅？

A：避免長時(shí)間光照，實(shí)驗(yàn)過程中減少激光或強(qiáng)光源照射時(shí)間，使用漂白劑效果更佳。

十一、總結(jié)

FITC-LCA（綠色熒光標(biāo)記小扁豆凝集素）結(jié)合了LCA高度特異的糖結(jié)合特性與FITC優(yōu)異的綠色熒光性能，為細(xì)胞表面糖蛋白及糖鏈結(jié)構(gòu)研究提供了強(qiáng)有力的工具。其穩(wěn)定的熒光信號、優(yōu)良的生物相容性和多樣的應(yīng)用前景，使其在腫瘤學(xué)、免疫學(xué)及糖生物學(xué)領(lǐng)域被廣泛采用。

西安pg電子官方生物專業(yè)提供各類熒光標(biāo)記產(chǎn)品及定制服務(wù)，覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料，滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機(jī)制研究等領(lǐng)域的需求。

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廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司

用途:科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)!

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