文獻:MT肽修飾陽離子脂質體作為新型基因載體的體外細胞學評價
作者:鹿月,宋寶慧,陳大為
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摘要:
目的通過體外細胞學實驗對MT肽修飾的陽離子脂質體進行基因載體遞送能力的評價.方法通過點擊反應制備DSPE-PEG2000-MT用于修飾陽離子脂質體,并通過1H-NMR對DSPE-PEG2000-MT進行結構表征.
以能夠表達增強型綠色熒光蛋白的pEGFP-C1報告基因為模型基因,首先通過瓊脂糖凝膠電泳實驗進行復合物包封率測定,選出最佳質量比,然后應用A549細胞對其進行細胞毒性評價,報告基因轉染與表達研究,以及細胞攝取實驗.以PEG2000修飾陽離子脂質體和空白陽離子脂質體為對照,充分研究MT肽修飾陽離子脂質體作為基因遞送系統(tǒng)的潛力.
結果MT肽修飾陽離子脂質體(cationic liposomes modified by DSPE-PEG2000-MT,MCL)對比參照陽離子脂質體(cationic liposomes,CL;cationic liposomes by DSPE-PEG2000,PCL)具有更高的穩(wěn)定性及包封率;
并通過細胞毒性實驗驗證MT肽修飾陽離子脂質體的細胞毒性較低;通過共聚焦顯微鏡和流式細胞儀驗證該復合物具有更好的細胞攝取能力,能夠促進綠色熒光蛋白的表達;
而且通過時間,溫度依賴性實驗表明了該攝取行為與時間和溫度有一定的關系.結論MT肽修飾的陽離子脂質體擁有較好的穩(wěn)定性,較低的細胞毒性以及更好的細胞攝取能力,是一個十分有潛力的基因遞送載體.
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