文獻(xiàn):原位膜生物素化可實(shí)現(xiàn)循環(huán)中小細(xì)胞外囊泡的直接標(biāo)記和準(zhǔn)確動(dòng)力學(xué)分析
鏈接:https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.1c01176
作者:于自力趙毅范淼吳敏夏厚福陳卓坤劉海明趙以芳陳剛*
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循環(huán)小細(xì)胞外囊泡 (sEVs) 是天然存在的納米級(jí)膜囊泡,可在細(xì)胞間傳遞生物活性分子。傳統(tǒng)上,為了評(píng)估其在體內(nèi)的行為,必須將循環(huán) sEVs 從血液中分離出來(lái),然后在體外用成像材料標(biāo)記,*后注射回動(dòng)物血液循環(huán)中進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。繁瑣的分離-標(biāo)記-回輸程序可能會(huì)對(duì)循環(huán) sEVs 的自然特性產(chǎn)生不良影響,從而改變其行為和體內(nèi)檢測(cè)的動(dòng)力學(xué)。在此,我們提出了一種原位生物素化策略,通過(guò)靜脈注射 DSPE-PEG-生物素直接標(biāo)記循環(huán) sEVs,旨在更生物友好且準(zhǔn)確地評(píng)估循環(huán) sEVs 的體內(nèi)動(dòng)力學(xué)。這種分析策略無(wú)需分離-標(biāo)記-回輸程序,也不會(huì)對(duì) sEVs 的自然行為產(chǎn)生不利影響。結(jié)果表明,小鼠體內(nèi)普通循環(huán)sEV的壽命約為3天。此外,我們首次揭示了不同細(xì)胞來(lái)源的循環(huán)sEV亞群在體內(nèi)動(dòng)力學(xué)上的差異,其中紅細(xì)胞來(lái)源的sEV壽命*長(zhǎng)。此外,與原位或自體移植的循環(huán)sEV相比,同種異體移植的循環(huán)sEV壽命*短。此外,原位生物素化策略也為生物素化的循環(huán)sEV的富集提供了一種方法。總之,本研究提供了一種原位標(biāo)記循環(huán)sEV的新策略,有助于準(zhǔn)確表征其體內(nèi)動(dòng)力學(xué),從而加速其作為生物標(biāo)志物和診療載體的未來(lái)應(yīng)用。
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