產(chǎn)品名稱:司美格魯肽/索馬魯肽-FITC的合成方法
合成方法
1. 反應(yīng)步驟
司美格魯肽的氨基化改性(可選):
若司美格魯肽的天然結(jié)構(gòu)中無足夠氨基,可通過化學(xué)修飾(如引入賴氨酸殘基)或生物偶聯(lián)技術(shù)(如點擊化學(xué))引入氨基。
反應(yīng)條件:根據(jù)修飾策略不同,可能涉及固相多肽合成(SPPS)或液相化學(xué)修飾,需嚴(yán)格控制反應(yīng)條件以保留生物活性。
FITC與司美格魯肽的偶聯(lián):
司美格魯肽的氨基與FITC的異硫氰酸酯基團在堿性條件(如PBS緩沖液,pH 9.0-10.0)下反應(yīng),形成硫脲鍵,生成司美格魯肽-FITC。
反應(yīng)條件:室溫,避光反應(yīng)2-4小時,無需催化劑。
純化:
通過高效液相色譜(HPLC)或超濾去除未反應(yīng)的FITC和司美格魯肽片段,得到純化后的司美格魯肽-FITC,純度≥95%。
2. 質(zhì)量控制
標(biāo)記效率:通過紫外-可見分光光度法驗證FITC與司美格魯肽的結(jié)合效率(通常要求標(biāo)記度≥0.5 mol FITC/mol司美格魯肽)。
純度檢測:采用質(zhì)譜(MS)和HPLC確認(rèn)產(chǎn)物純度及分子量準(zhǔn)確性。
活性驗證:通過GLP-1受體結(jié)合實驗(如cAMP積累 assay)確認(rèn)司美格魯肽的生物活性未因標(biāo)記過程受損。
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