FITC-NHS 綠色熒光素標記活性酯

FITC-NHS活性酯型熒光素 | 用于蛋白、多肽及小分子胺修飾

一、產(chǎn)品名稱及基本信息

中文名稱：熒光素-NHS 酯 / 綠色熒光素標記活性酯

英文名稱：Fluorescein-NHS Ester / FITC-NHS

別名：熒光素N-羥基琥珀酰亞胺酯、FITC-活性酯、熒光素NHS酯

CAS號：82927-26-4

分子式：C24H15NO9

分子量：461.38 Da

外觀：橙黃色至黃綠色粉末

純度：≥95%（HPLC）

溶解性：DMSO、DMF、無水二氯甲烷、干燥乙腈、無水PBS等

儲存條件：-20°C避光、干燥密封保存

二、產(chǎn)品概述

FITC-NHS（Fluorescein Isothiocyanate N-hydroxysuccinimide ester）是一種綠色熒光染料的活性酯衍生物，通過將熒光素上的羧基修飾為NHS酯而制成。其能夠與胺基（–NH?）反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵，是生物分子（如蛋白質(zhì)、多肽、體、氨基聚合物等）標記中常用的活性染料之一。

作為一種高效、廣泛應(yīng)用的熒光標簽，F(xiàn)ITC-NHS 具有優(yōu)異的水溶性、化學穩(wěn)定性和強烈的綠色熒光發(fā)射，已廣泛用于細胞成像、蛋白標記、體示蹤、微球修飾、微陣列芯片檢測、納米材料構(gòu)建等前沿生命科學與材料科學研究領(lǐng)域。

三、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

1. 熒光特性

激發(fā)波長（λEx）：494–495 nm

發(fā)射波長（λEm）：518–520 nm

熒光顏色：綠色

光穩(wěn)定性：良好，但需避強光照射以防漂白

2. NHS酯反應(yīng)特性

NHS（N-Hydroxysuccinimide）酯是常見的羧酸活化形式之一，在堿性條件（pH 7.5–9.0）下易于與伯胺發(fā)生反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。其反應(yīng)速率快、選擇性高，適用于：

蛋白質(zhì)（如賴氨酸殘基）

多肽N端

氨基修飾材料

胺基聚合物（如PLL、PEG-NH?）

四、合成背景與原理

FITC-NHS 是通過熒光素與 NHS 和 DCC 或 EDC 等縮合劑作用合成。該結(jié)構(gòu)一端含有熒光素母體，另一端為NHS酯基團，可與含氨基的目標分子通過親核取代反應(yīng)偶聯(lián)，生成熒光標記產(chǎn)物，適用于定量或定性檢測。

五、產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域

1. 蛋白質(zhì)與體標記

與IgG、牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白、酶類等蛋白分子反應(yīng)

用于構(gòu)建熒光體、免疫染色、Western blot、ELISA、FACS 等實驗

2. 細胞與組織成像

標記表面蛋白、胞內(nèi)結(jié)構(gòu)、細胞膜

細胞攝取及胞內(nèi)追蹤研究

3. 多肽與核酸修飾

多肽合成中的熒光標簽引入

適用于 N 端標記或側(cè)鏈含胺殘基標記

4. 納米材料與聚合物修飾

標記含氨基的PEG、納米粒、金屬有機框架（MOF）、樹枝狀聚合物

構(gòu)建熒光示蹤的納米藥物遞送系統(tǒng)

5. 微球與芯片標記

結(jié)合氨基修飾的微球、玻璃基底、硅片等用于生物傳感器和微陣列芯片構(gòu)建

六、實驗操作建議

1. 溶解方法

使用干燥、無水的 DMSO 或 DMF 溶解，濃度 10–20 mM

使用前新鮮配置，避免吸潮降解

2. 偶聯(lián)反應(yīng)條件

緩沖液：碳酸鹽緩沖液、HEPES、PBS（pH 7.5–8.5，不能含胺）

反應(yīng)時間：30 min ~ 2 h

反應(yīng)溫度：室溫或 4°C（緩慢反應(yīng)可減少副反應(yīng)）

摩爾比：1:1～10（胺基底物:FITC-NHS）

3. 去除未反應(yīng)FITC-NHS

可用透析、凝膠過濾（如 Sephadex G-25）、HPLC等方法純化標記產(chǎn)物

七、注意事項與常見問題

問題 解答

NHS酯是否穩(wěn)定？ 對水敏感，遇水或潮濕空氣易水解，需避光、干燥保存，建議一次性用完。

反應(yīng)緩沖液是否能使用 Tris？ 否。Tris 含有一級胺，會與 FITC-NHS 競爭反應(yīng)，建議使用不含胺基的緩沖液（如碳酸鹽緩沖液）。

如何驗證標記成功？ 可通過 UV-Vis 測定 FITC 吸收峰（495 nm），或使用 SDS-PAGE、流式細胞儀、共聚焦顯微鏡等方法分析。

是否可用于活細胞染色？ FITC-NHS 本身不適用于直接孵育活細胞，應(yīng)先標記體或分子后清洗再應(yīng)用于細胞實驗。

八、儲存與穩(wěn)定性

保存溫度：–20°C以下

避光保存：FITC對光敏感，避光操作，使用棕色瓶分裝

干燥要求：必須密封干燥環(huán)境，避免水汽進入

有效期：在密封、干燥、避光狀態(tài)下可穩(wěn)定保存12個月

建議開封后分裝成小份量，避免反復(fù)開蓋吸潮。

九、包裝規(guī)格與定制服務(wù)

包裝規(guī)格 推薦用途

1 mg 小試篩選，偶聯(lián)試驗

5 mg 常規(guī)蛋白、多肽標記

10 mg 多樣品標記，分子構(gòu)建

50 mg / 100 mg 大量標記或商業(yè)應(yīng)用

定制服務(wù)：

標記度優(yōu)化、純度調(diào)控

其他熒光染料衍生NHS酯（如 TRITC-NHS, Cy5-NHS 等）

批量合成，提供COA、MSDS、HPLC圖譜、NMR等報告

十、總結(jié)

FITC-NHS 是一類高效、廣泛應(yīng)用的綠色熒光活性酯試劑，能高選擇性地與生物分子中的胺基反應(yīng)，實現(xiàn)可視化標記和功能分子構(gòu)建。其在蛋白標記、細胞成像、納米材料功能化等領(lǐng)域具有不可替代的地位。

西安pg電子官方生物專業(yè)提供各類熒光標記產(chǎn)品及定制服務(wù)，覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料，滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領(lǐng)域的需求。

西安pg電子官方生物確保標記分子高效、穩(wěn)定且保留生物活性。我們支持個性化定制，靈活設(shè)計標記方案，快速響應(yīng)客戶需求。

廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司

用途:科研

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實驗!

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