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          Ovalbumin-FITC,F(xiàn)ITC修飾卵清蛋白用于免疫活性分析與原傳遞示蹤
          發(fā)布時(shí)間:2025-07-18     作者:ssl   分享到:

          Ovalbumin-FITC

          FITC修飾卵清蛋白用于免疫活性分析與原傳遞示蹤

          一、產(chǎn)品概述

          中文名稱:FITC標(biāo)記卵白蛋白

          英文名稱:Ovalbumin-FITC

          別名:FITC-Ova、熒光素標(biāo)記OVA

          分子量:約45 kDa(天然卵白蛋白)

          FITC標(biāo)記度:通常在3~10 FITC分子/OVA分子之間,可定制

          熒光激發(fā)/發(fā)射波長:495 nm / 519 nm(FITC特性)

          外觀:黃色至綠色凍干粉末或溶液

          純度:≥95%(SDS-PAGE)

          溶解性:可溶于水、PBS、Tris緩沖液

          儲存條件:-20°C 避光,避免反復(fù)凍融

          用途級別:科研專用,不用于臨床診斷或治療

          二、卵白蛋白與FITC標(biāo)記原理

          1. 卵白蛋白(Ovalbumin, OVA)

          卵白蛋白是從雞蛋蛋白中提取的一種單鏈糖蛋白,是研究中常用的原模型蛋白,具有良好的免疫原性和生物活性。在免疫學(xué)研究、原遞呈實(shí)驗(yàn)、樹突狀細(xì)胞功能研究、T細(xì)胞激活機(jī)制中被廣泛應(yīng)用。

          2. FITC(Fluorescein Isothiocyanate)

          FITC是一種綠色熒光染料,帶有反應(yīng)性異硫氰酸酯(–N=C=S)基團(tuán),可與蛋白質(zhì)中的賴氨酸殘基上的氨基形成穩(wěn)定的硫脲鍵,實(shí)現(xiàn)共價(jià)熒光標(biāo)記。

          3. Ovalbumin-FITC 的制備原理

          在堿性緩沖條件(pH 8.5~9.0)下,將FITC與OVA反應(yīng);

          反應(yīng)后通過透析或凝膠過濾去除游離FITC;

          純化后凍干或濃縮儲存。

          三、理化性質(zhì)

          項(xiàng)目 參數(shù)

          分子量 ~45 kDa(天然OVA)

          熒光染料 FITC(Fluorescein)

          激發(fā)峰 495 nm

          發(fā)射峰 519 nm

          溶解度 高度可溶于水性緩沖液

          穩(wěn)定性 冷凍避光條件下穩(wěn)定12個(gè)月

          四、應(yīng)用方向

          1. 原攝取與處理實(shí)驗(yàn)

          Ovalbumin 是研究樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞等 APC(原遞呈細(xì)胞) 對原的內(nèi)吞、加工與遞呈機(jī)制的重要模型;

          FITC標(biāo)記可實(shí)現(xiàn)原的可視化追蹤和定量分析;

          結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)或熒光顯微鏡評估APC對原的攝取能力。

          2. 免疫學(xué)研究

          Ovalbumin-FITC 作為經(jīng)典 MHC I/II 路徑原,廣泛用于研究T細(xì)胞激活、交叉遞呈(Cross-presentation);

          可用于建立OVA模型小鼠(如 OT-I、OT-II 小鼠)中CD4?/CD8? T細(xì)胞激活實(shí)驗(yàn);

          用于疫苗開發(fā)與遞送系統(tǒng)效率驗(yàn)證。

          3. 細(xì)胞內(nèi)吞與轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制

          FITC-Ova進(jìn)入細(xì)胞后可用于觀察其在內(nèi)體、溶酶體中的定位與分布;

          可結(jié)合LysoTracker等染料進(jìn)行共定位實(shí)驗(yàn);

          評估胞吞活性和原釋放路徑。

          4. 納米顆粒/藥物載體研究

          將FITC-Ova負(fù)載于納米粒、脂質(zhì)體、凝膠等載體中,研究其靶向性釋放與細(xì)胞攝;

          適用于藥物遞送系統(tǒng)可視化、定量釋放與胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)研究。

          5. 流式細(xì)胞術(shù)與成像分析

          流式細(xì)胞儀(FACS)用于檢測原攝取效率;

          共聚焦或激光掃描顯微鏡用于實(shí)時(shí)可視化分析;

          結(jié)合DAPI、Cy5等染料進(jìn)行多通道染色。

          Ovalbumin-FITC,F(xiàn)ITC修飾卵清蛋白

          五、實(shí)驗(yàn)操作建議

          1. 溶解方法

          建議使用無菌PBS或純水溶解至所需濃度;

          溶液中可加入0.02% NaN?作防腐劑(如長期使用);

          溶解后應(yīng)分裝避光保存,避免反復(fù)凍融。

          2. 推薦使用濃度

          應(yīng)用 建議濃度

          細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn) 10–100 μg/mL

          流式分析 1–10 μg/mL

          小鼠注射(免疫) 10–100 μg/只

          納米載體負(fù)載實(shí)驗(yàn) 可根據(jù)載體比調(diào)整

          六、產(chǎn)品規(guī)格與定制服務(wù)

          包裝規(guī)格 編號示例 備注

          1 mg OVA-FITC-1 小規(guī)模實(shí)驗(yàn)

          5 mg OVA-FITC-5 多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)

          10 mg OVA-FITC-10 大樣本使用

          定制服務(wù) 可調(diào)標(biāo)記度、凍干粉或液體、無菌無內(nèi)毒素版本

          支持以下定制:

          高標(biāo)記度(>10 FITC/OVA);

          與Cy5、Rhodamine、AF488等熒光染料替換;

          降低自發(fā)熒光背景版本;

          與納米粒/膠束共修飾服務(wù)。

          七、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)(QC)

          檢測項(xiàng)目 方法 標(biāo)準(zhǔn)

          純度 SDS-PAGE、UV ≥95%

          FITC標(biāo)記度 UV法(495/280 nm) 3–10 mol FITC/mol OVA

          自由FITC含量 HPLC 不可檢出或微量

          溶解度 觀察 完全溶于PBS

          熒光穩(wěn)定性 光照試驗(yàn) ≥90%保留率(7天)

          八、儲存與有效期

          狀態(tài) 儲存條件 有效期

          凍干粉末 -20°C 避光 12個(gè)月

          水溶液 4°C 避光,避免污染 建議7天內(nèi)使用

          冷凍分裝 -80°C可長期保存 ≥12個(gè)月

          注意事項(xiàng):

          FITC容易光漂白,請避光操作;

          避免反復(fù)凍融,建議分裝使用;

          開瓶后盡量在2周內(nèi)使用完畢。

          九、常見問題(FAQ)

          Q1:Ovalbumin-FITC 是否適用于體內(nèi)成像?

          A:FITC在體內(nèi)成像穿透性有限(主要限于淺層組織或透明結(jié)構(gòu)),如需深層成像,建議使用近紅外染料(如Cy7標(biāo)記OVA)。

          Q2:是否適用于CD4?/CD8? T細(xì)胞激活實(shí)驗(yàn)?

          A:是,OVA-FITC 可用于加載到DC細(xì)胞,激活來自O(shè)T-I/OT-II小鼠的T細(xì)胞(分別識別OVA257-264和OVA323-339)。

          Q3:能否用于疫苗遞送載體的示蹤?

          A:完全可以,F(xiàn)ITC-Ova廣泛用于構(gòu)建可視化疫苗遞送系統(tǒng)和原釋放實(shí)驗(yàn)。

          十、總結(jié)

          Ovalbumin-FITC 是一款經(jīng)典的免疫學(xué)研究工具蛋白,結(jié)合卵白蛋白的原性和FITC的可視化特性,成為研究原攝取、細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)、T細(xì)胞激活以及納米載體遞送等方向的理想工具。

          產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格純化、標(biāo)記度控制與質(zhì)控檢測,適配多種實(shí)驗(yàn)平臺,如流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦顯微成像、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)與小鼠動物模型?筛鶕(jù)不同實(shí)驗(yàn)需求定制不同染料、標(biāo)記度或載體組合。

          西安pg電子官方生物專業(yè)提供各類熒光標(biāo)記產(chǎn)品及定制服務(wù),覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機(jī)制研究等領(lǐng)域的需求。

          西安pg電子官方生物確保標(biāo)記分子高效、穩(wěn)定且保留生物活性。我們支持個(gè)性化定制,靈活設(shè)計(jì)標(biāo)記方案,快速響應(yīng)客戶需求。

          廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司

          用途:科研

          狀態(tài):固體/粉末/溶液

          產(chǎn)地:西安

          溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!

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