Ovalbumin-FITC
FITC修飾卵清蛋白用于免疫活性分析與原傳遞示蹤
一、產(chǎn)品概述
中文名稱:FITC標(biāo)記卵白蛋白
英文名稱:Ovalbumin-FITC
別名:FITC-Ova、熒光素標(biāo)記OVA
分子量:約45 kDa(天然卵白蛋白)
FITC標(biāo)記度:通常在3~10 FITC分子/OVA分子之間,可定制
熒光激發(fā)/發(fā)射波長:495 nm / 519 nm(FITC特性)
外觀:黃色至綠色凍干粉末或溶液
純度:≥95%(SDS-PAGE)
溶解性:可溶于水、PBS、Tris緩沖液
儲存條件:-20°C 避光,避免反復(fù)凍融
用途級別:科研專用,不用于臨床診斷或治療
二、卵白蛋白與FITC標(biāo)記原理
1. 卵白蛋白(Ovalbumin, OVA)
卵白蛋白是從雞蛋蛋白中提取的一種單鏈糖蛋白,是研究中常用的原模型蛋白,具有良好的免疫原性和生物活性。在免疫學(xué)研究、原遞呈實(shí)驗(yàn)、樹突狀細(xì)胞功能研究、T細(xì)胞激活機(jī)制中被廣泛應(yīng)用。
2. FITC(Fluorescein Isothiocyanate)
FITC是一種綠色熒光染料,帶有反應(yīng)性異硫氰酸酯(–N=C=S)基團(tuán),可與蛋白質(zhì)中的賴氨酸殘基上的氨基形成穩(wěn)定的硫脲鍵,實(shí)現(xiàn)共價(jià)熒光標(biāo)記。
3. Ovalbumin-FITC 的制備原理
在堿性緩沖條件(pH 8.5~9.0)下,將FITC與OVA反應(yīng);
反應(yīng)后通過透析或凝膠過濾去除游離FITC;
純化后凍干或濃縮儲存。
三、理化性質(zhì)
項(xiàng)目 參數(shù)
分子量 ~45 kDa(天然OVA)
熒光染料 FITC(Fluorescein)
激發(fā)峰 495 nm
發(fā)射峰 519 nm
溶解度 高度可溶于水性緩沖液
穩(wěn)定性 冷凍避光條件下穩(wěn)定12個(gè)月
四、應(yīng)用方向
1. 原攝取與處理實(shí)驗(yàn)
Ovalbumin 是研究樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞等 APC(原遞呈細(xì)胞) 對原的內(nèi)吞、加工與遞呈機(jī)制的重要模型;
FITC標(biāo)記可實(shí)現(xiàn)原的可視化追蹤和定量分析;
結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)或熒光顯微鏡評估APC對原的攝取能力。
2. 免疫學(xué)研究
Ovalbumin-FITC 作為經(jīng)典 MHC I/II 路徑原,廣泛用于研究T細(xì)胞激活、交叉遞呈(Cross-presentation);
可用于建立OVA模型小鼠(如 OT-I、OT-II 小鼠)中CD4?/CD8? T細(xì)胞激活實(shí)驗(yàn);
用于疫苗開發(fā)與遞送系統(tǒng)效率驗(yàn)證。
3. 細(xì)胞內(nèi)吞與轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制
FITC-Ova進(jìn)入細(xì)胞后可用于觀察其在內(nèi)體、溶酶體中的定位與分布;
可結(jié)合LysoTracker等染料進(jìn)行共定位實(shí)驗(yàn);
評估胞吞活性和原釋放路徑。
4. 納米顆粒/藥物載體研究
將FITC-Ova負(fù)載于納米粒、脂質(zhì)體、凝膠等載體中,研究其靶向性釋放與細(xì)胞攝;
適用于藥物遞送系統(tǒng)可視化、定量釋放與胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)研究。
5. 流式細(xì)胞術(shù)與成像分析
流式細(xì)胞儀(FACS)用于檢測原攝取效率;
共聚焦或激光掃描顯微鏡用于實(shí)時(shí)可視化分析;
結(jié)合DAPI、Cy5等染料進(jìn)行多通道染色。
五、實(shí)驗(yàn)操作建議
1. 溶解方法
建議使用無菌PBS或純水溶解至所需濃度;
溶液中可加入0.02% NaN?作防腐劑(如長期使用);
溶解后應(yīng)分裝避光保存,避免反復(fù)凍融。
2. 推薦使用濃度
應(yīng)用 建議濃度
細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn) 10–100 μg/mL
流式分析 1–10 μg/mL
小鼠注射(免疫) 10–100 μg/只
納米載體負(fù)載實(shí)驗(yàn) 可根據(jù)載體比調(diào)整
六、產(chǎn)品規(guī)格與定制服務(wù)
包裝規(guī)格 編號示例 備注
1 mg OVA-FITC-1 小規(guī)模實(shí)驗(yàn)
5 mg OVA-FITC-5 多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)
10 mg OVA-FITC-10 大樣本使用
定制服務(wù) 可調(diào)標(biāo)記度、凍干粉或液體、無菌無內(nèi)毒素版本
支持以下定制:
高標(biāo)記度(>10 FITC/OVA);
與Cy5、Rhodamine、AF488等熒光染料替換;
降低自發(fā)熒光背景版本;
與納米粒/膠束共修飾服務(wù)。
七、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)(QC)
檢測項(xiàng)目 方法 標(biāo)準(zhǔn)
純度 SDS-PAGE、UV ≥95%
FITC標(biāo)記度 UV法(495/280 nm) 3–10 mol FITC/mol OVA
自由FITC含量 HPLC 不可檢出或微量
溶解度 觀察 完全溶于PBS
熒光穩(wěn)定性 光照試驗(yàn) ≥90%保留率(7天)
八、儲存與有效期
狀態(tài) 儲存條件 有效期
凍干粉末 -20°C 避光 12個(gè)月
水溶液 4°C 避光,避免污染 建議7天內(nèi)使用
冷凍分裝 -80°C可長期保存 ≥12個(gè)月
注意事項(xiàng):
FITC容易光漂白,請避光操作;
避免反復(fù)凍融,建議分裝使用;
開瓶后盡量在2周內(nèi)使用完畢。
九、常見問題(FAQ)
Q1:Ovalbumin-FITC 是否適用于體內(nèi)成像?
A:FITC在體內(nèi)成像穿透性有限(主要限于淺層組織或透明結(jié)構(gòu)),如需深層成像,建議使用近紅外染料(如Cy7標(biāo)記OVA)。
Q2:是否適用于CD4?/CD8? T細(xì)胞激活實(shí)驗(yàn)?
A:是,OVA-FITC 可用于加載到DC細(xì)胞,激活來自O(shè)T-I/OT-II小鼠的T細(xì)胞(分別識別OVA257-264和OVA323-339)。
Q3:能否用于疫苗遞送載體的示蹤?
A:完全可以,F(xiàn)ITC-Ova廣泛用于構(gòu)建可視化疫苗遞送系統(tǒng)和原釋放實(shí)驗(yàn)。
十、總結(jié)
Ovalbumin-FITC 是一款經(jīng)典的免疫學(xué)研究工具蛋白,結(jié)合卵白蛋白的原性和FITC的可視化特性,成為研究原攝取、細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)、T細(xì)胞激活以及納米載體遞送等方向的理想工具。
產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格純化、標(biāo)記度控制與質(zhì)控檢測,適配多種實(shí)驗(yàn)平臺,如流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦顯微成像、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)與小鼠動物模型?筛鶕(jù)不同實(shí)驗(yàn)需求定制不同染料、標(biāo)記度或載體組合。
西安pg電子官方生物專業(yè)提供各類熒光標(biāo)記產(chǎn)品及定制服務(wù),覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機(jī)制研究等領(lǐng)域的需求。
西安pg電子官方生物確保標(biāo)記分子高效、穩(wěn)定且保留生物活性。我們支持個(gè)性化定制,靈活設(shè)計(jì)標(biāo)記方案,快速響應(yīng)客戶需求。
廠家:西安pg電子官方生物科技有限公司
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
產(chǎn)地:西安
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!
相關(guān)產(chǎn)品:
FITC-PEG-NH2,MW:3400
FITC-Lysozyme
PLGA10K-FITC
葛根素-FITC
FITC修飾二氧化硅(30nm)
FITC修飾二氧化硅(50nm)
FITC-Alginate
dextran-FITC(70kd)
FITC標(biāo)記LLRSTGF