DBCO-NHS酯（全稱：Dibenzocyclooctyne-N-hydroxysuccinimide ester），是一種功能性活性酯試劑，廣泛應用于生物正交化學中的生物分子標記和偶聯(lián)反應。

其結構由二苯并環(huán)辛炔（DBCO）基團與N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS酯）通過酯鍵連接而成。DBCO是一種環(huán)狀烯炔結構，具備獨特的應力誘導環(huán)張開能力，能夠在生理條件下與疊氮基（azide）化合物發(fā)生快速且高效的銅自由“點擊”反應（Strain-Promoted Azide-Alkyne Cycloaddition, SPAAC），而NHS酯部分則具有優(yōu)良的活性，可與含有初級胺基的生物分子（如蛋白質(zhì)、抗體、肽鏈或氨基修飾的核酸）形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

主要特點與優(yōu)勢

1. 銅自由點擊反應：DBCO-NHS Ester所含的DBCO結構能在無催化劑（尤其是銅離子）的條件下與疊氮基發(fā)生高效反應，避免了銅催化“點擊”反應中可能存在的細胞毒性和副反應，適合細胞和體內(nèi)生物標記應用。

2. 高反應特異性與效率：SPAAC反應速度快，反應條件溫和，產(chǎn)率高，且副產(chǎn)物少，保證標記和偶聯(lián)的高選擇性和高純度。

3. 多功能性偶聯(lián)位點：NHS酯結構可快速且高效地與蛋白質(zhì)或其他含胺基分子發(fā)生酰胺化反應，實現(xiàn)DBCO基團的穩(wěn)定接枝，為后續(xù)的生物正交反應提供結合位點。

4. 良好的水溶性和穩(wěn)定性：DBCO-NHS Ester在有機溶劑和緩沖液中穩(wěn)定，便于儲存和使用，適合多種生物實驗體系。

應用領域

• 蛋白質(zhì)和抗體的標記與修飾：通過NHS酯與蛋白質(zhì)賴氨酸殘基的氨基結合，將DBCO功能基團引入蛋白質(zhì)，使其具備與疊氮基標記分子快速反應的能力，實現(xiàn)蛋白質(zhì)的熒光標記、藥物偶聯(lián)或功能化改造。

• 核酸及寡核苷酸修飾：DBCO-NHS可用于修飾含氨基修飾的寡核苷酸鏈，實現(xiàn)與疊氮基功能分子的高效偶聯(lián)，用于探針制備和靶向輸送。

• 生物大分子間的交聯(lián)和構建納米材料：利用SPAAC技術構建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-核酸等復合物，或用于生物材料的功能化改造。

• 細胞和體內(nèi)標記：DBCO基團能夠在細胞內(nèi)無毒條件下與疊氮標記物進行快速結合，廣泛用于細胞成像、藥物遞送系統(tǒng)的構建及生物診斷等領域。

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