產(chǎn)品名稱:DBCO修飾葡聚糖,Dextran4-DBCO的合成方法
合成方法
方法1:羧基活化法(適用于羧化葡聚糖)
羧化葡聚糖制備:
將葡聚糖溶于磷酸鹽緩沖液(PBS),加入高碘酸鈉(NaIO?)氧化鄰位羥基生成醛基,再與氨基乙酸(Glycine)反應(yīng)引入羧基。
或直接購買預(yù)羧化的葡聚糖(如Dextran-COOH)。
DBCO偶聯(lián):
將羧化葡聚糖溶于MES緩沖液(pH 5.5),加入EDC和NHS活化羧基(30分鐘)。
加入DBCO-NH?(過量),室溫反應(yīng)2-4小時。
透析(MWCO 3.5 kDa)去除未反應(yīng)試劑,凍干得Dextran4-DBCO。
方法2:羥基直接反應(yīng)法(CNBr活化)
葡聚糖活化:
將葡聚糖溶于二甲基亞砜(DMSO),加入CNBr(1:1摩爾比),室溫反應(yīng)30分鐘生成氰酸酯中間體。
快速加入DBCO-胺(過量),繼續(xù)反應(yīng)2小時。
透析(MWCO 3.5 kDa)純化,凍干得產(chǎn)物。
表征方法
NMR:檢測DBCO特征峰(如芳香質(zhì)子信號)確認(rèn)修飾成功。
FTIR:觀察酰胺鍵(1650 cm??)或酯鍵(1740 cm??)的吸收峰。
熒光胺法:定量測定剩余游離氨基,計算DBCO修飾度。
GPC:分析分子量分布,確認(rèn)無交聯(lián)或降解。
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